茜素红染色

Sophia

昨天做了一下成骨诱导后的茜素红染色，竟然一点都没染上！大家帮忙讨论一下是什么原因呢？
8 Z" O7 L6 K0 `) x+ {1 |$ j7 c0 w4 u我是这样做的：PBS冲洗两遍后，4%多聚甲醛固定10分钟，再PBS冲洗两遍，加入茜素红染液，37度孵育30分钟，PBS冲洗两遍，显微镜下观察，没有见到染色，后来有同学建议我再加入茜素红过夜，第二天再看，但还是没有染色！% ~( A. a: m7 |6 R/ S& k7 b
我是成骨诱导21天后染的。我的染色过程有问题吗？

细胞海洋

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0 y8 o1 _  u: z建议你发新帖提问

chichao0000

最近看到一篇文献上的成骨诱导，茜素红染色图，感觉和自己做的差距很大（这个图染的非常明显，而且时间短），不知各位战友有获得和这篇文献报道相似的图吗？

chichao0000

我认为是诱导的时间不够，形成钙结节后才能染出阳性结果，我做的大鼠脂肪干细胞诱导35天左右，有阳性结节出现，不是非常多。

细胞海洋

回复 jinggyf 的帖子$ V3 i/ m' ?& t( Q3 O

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jinggyf

回复 sydfxt 的帖子! D& @( P' z: |

" t9 k! F% q) A0 {  j请问一下，诱导没有成骨的原因有哪些呢？我用的是贝塔甘油磷酸钠、VC称量后放入离心管中，加入培养基溶解，过滤除菌，后再加入地塞米松和血清。1 c2 Y  q, o6 t
浓度分别为贝塔甘油磷酸钠10mM,VC 20mg/ml，地米10的-7mol/L，10%FBS

小猪快跑

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麻烦问一下，成骨诱导多少天就能看见细胞聚集和黑色的钙结节啊？还有黑色的钙结节长成什么样子啊？有没有图片参观一下啊？

zxdlala

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: O+ |9 j! C6 v3 W# L) P/ p' y6 P; j/ Y+ n
我觉得应该是8啊，钙化结节里面碱性磷酸酶是阳性的

gact

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是茜素红-S？？) F! M& [' e* t3 l# L
还是茜素红？？% j' Q1 q1 x0 L/ {; ]+ G

gact

回复 regene 的帖子0 }  u9 x$ K* ^" L! l! o3 c$ G

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还是茜素红？？
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