脐带干细胞如何分离

sydfxt

各位高手,我最近开始的取脐带干细胞,我的方法是:
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2.用眼科剪剪成碎片
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6.然后过筛网,此时感觉液体仍然很粘稠...直接放培养瓶中培养. F+ l/ G/ S: x# D

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sydfxt

各位高手,我最近开始的取脐带干细胞,我的方法是:8 }$ S/ `  n/ K8 ~# `9 N
1.将脐带中的血管挑除  D% S3 F7 d( |3 {
2.用眼科剪剪成碎片
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操作完后直接镜下观察结果发现没有细胞,这是怎么回事?我哪个环节出了问题,谢谢指点 % [6 n' S) v8 L  O1 Q% i0 q

henryjia

液体仍然很粘稠,此时过筛网肯定损失绝大部分细胞。
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我也遇到同样问题，稀释5倍左右冲洗后，把仍然较粘稠的培养液种植，后来发现有一瓶生长良好。另外2平很差。 正在尝试不同方法消化。7 P3 K+ J& U. T4 A, y% Q& n( [
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相信这是一个非常普遍的问题，斑竹是否可以给专题讨论，期待干细胞的分离？提前谢了。

vae有何不可

附一篇用酶进行消化和分离培养脐带干细胞的文章。

西瓜太郎

是不是你用胶原酶时间不够啊？一般单用胶原酶的都是消化过夜，还有就是你半小时后的消化液里含组织块的多么?有的时候要看消化的效果不是一味的追求时间，个人感觉是时间不够，细胞数消化下来的少结果当然就没了，胶原酶对细胞伤害小，可以消化时间长点。个人的一点意见   -- --% D, y* K, [# r2 T* q: y

sydfxt

回复 西瓜太郎 的帖子
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我觉得消化的还可以,组织块基本都消化没了,当然,为了减少消化液的量,下次决定加点胰酶进去

chb611301

我的方法是，用I型胶原酶消化过夜，再用胰酶消化5-10MIN ,然后用大量的生理盐水去洗涤 一般都用到500ml 以上去洗细胞，这样就不会太粘稠！离心收集后再用大体积重悬，此时再过筛，我自己做的时候觉得这样不会损失多少细胞！自己的一点体会啊