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[请教] 如何将细胞单克隆挑下来   [复制链接]

zoe

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包包
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楼主
发表于 2010-12-16 10:00 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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在培养皿中的贴壁细胞，如何将细胞单克隆挑下来？
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chliu

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25楼
发表于 2011-5-26 09:00 |只看该作者
回复 zoe 的帖子% p2 O6 m9 o9 ~. V* x5 o( v7 v
8 E' o4 Z  _& m. T& o% W. M4 }1 [* k
我们是先用PBS洗两次，加入PBS，在解剖镜下用20ul的枪头将单克隆整个挑起来，吸至枪头中，加入已经加好胰酶的96孔板中，用胰酶消化。
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宗介

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24楼
发表于 2011-5-25 01:08 |只看该作者
加胰酶用枪头吹
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BIOLOGY

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23楼
发表于 2011-5-23 13:16 |只看该作者
用玻璃针挑比较好，而且能吹的很散
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bin

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22楼
发表于 2011-5-23 11:08 |只看该作者
,看来这似乎是个难关耶。
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bin

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21楼
发表于 2011-5-23 10:49 |只看该作者
即将要用到的技术，还不会，谢谢各位了。
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jhu132llh

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20楼
发表于 2011-1-14 11:58 |只看该作者
这个在我们大实验室其他组倒是很容易$ V' B9 Q# j& ^" }. [* f
因为我们大实验室有做克隆的
' G- s; I: [# i! ~* [" B所以3 w* {3 P, l" G7 v
用遗传操作系统很容易就可以将细胞克隆吸出来，极度精确
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future007

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19楼
发表于 2011-1-14 11:03 |只看该作者
我见过两种，都是需要先在显微镜下用笔将克隆圈住。一种是用克隆杯，底部抹上凡士扣在画好的克隆处，用胰蛋白酶加到克隆杯里消化，在终止消化，最后吸出液体传代。另外一种就是直接用枪头反复划圈住的克隆的区域，用PBS轻轻地从皿的一侧冲洗。最后收集PBS液，直接传代到新的皿里，不要忘了补加细胞培养液。
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BIOLOGY

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18楼
发表于 2011-1-11 20:40 |只看该作者
体视镜下，把克隆用玻璃针管连着一段橡胶管做的口吸管吸出，胰酶消化，血清终止，种入新的皿中即可
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siyue13

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17楼
发表于 2011-1-11 20:18 |只看该作者
用克隆环
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