EB形成过程的问题～

wangzhuo822001

最近做了几次EB都很失败～
: Y+ m9 Q! }: S具体问题是：1.悬滴三天培养，发觉液滴里面的EB好像都不止一个，而且形态不一，最重要的是感觉有很多不规则形状的像死细胞团的杂质在液滴里面；
6 R2 P% s4 P) {) S2 A, t2 Y5 T/ Q2.把这些液体取下来悬浮，一天后培养基就变得比较浑浊了，感觉里面很多细胞碎片样的东西；# {" [( F; D. h8 ?
3.形成的所谓的EB感觉很松散，悬浮两天后感觉中间都没有密集的细胞，EB也不像EB了～/ _) x0 ]: D8 _6 [( r& l
郁闷啊～～是不是细胞污染了？又不知道是什么污染～ ) A; v3 n6 r& @% x+ X
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如果ES细胞就已经污染了，哭泣啊～那不是所有的实验都遭了～) [/ F4 }0 K# p! B$ ]3 a

nicoleQI

EB的形成和你挑的细胞集落有重要关系的，挑比较致密的集落会长得好一点……

st_oliver

回复 wangzhuo822001 的帖子$ S! j' O7 s5 c

9 w" U, h- i# |$ b6 p首先，楼主不要泄气，做实验经常会出现这样的情况，仔细分析找原因。5 A! A2 O( `' m- m' v( T
其次，你的这种情况，我似乎也见过，EB形成的比较松散，不够致密有关，主要原因个人认为是细胞本身的缘故，如果操作什么都没问题的话，松散的话就会有细胞漂出去，单独再形成类EB。
: I/ w7 O# t7 o再次，至于你说的污染不污染，根据你的描述，也不一定可以确定，最好是能仔细检查下，要是污染了，就比较不幸了。要及时清查，消除污染源！* o4 ^# r/ o2 s
最后，祝你实验顺利！