大家看看小鼠ES细胞集落是这样的吗？我是新手，又刚养细胞，谢谢了。

lihaining1110

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胰酶消化吹打后是小而圆的单个细胞，但是集落怎么感觉这么别扭呀。我是无滋养层培养，添加LIF.  U; H- j2 S0 x0 |1 L; L

" Y) J, n9 u5 @9 h培养细胞时我还发现有另一种细胞集落，圆形或椭圆，边界明亮，但是长得比较慢。不知道那种是正常的。希望大家指教，谢谢了。

hcluo

建议用一些饲养层，胚胎干细胞在传代时，可以吹散形成单个细胞的，然后形成单克隆的集落的。

lihaining1110

麻烦高手传一些图片让我看看。谢谢了、

lihaining1110

麻烦高手传一些图片让我看看。谢谢了、

周会

感觉像是分化了，都没有明显边界了，正常的应该是边缘折光性很强的！
, s, Z5 _5 `; N还是先用feeder培养吧，祝你好运！

lihaining1110

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" B' F- T+ ]/ \2 p2 s1 h
/ \4 v, D: s, k: K谢谢

cony

在无MEF下培养ESC时，ES会出现不规则形态，如图所示，但是一旦养到MEF上时，就好了，我试过。。你可以试试

esc123esc

feeder-free就是这样的，用feeder吧，会好一点，还有就是很多人都说传代时吹打成单细胞，可是我的老师说不可以这样，要3,4个细胞的小集落才是比较好的，单细胞的失去细胞之间的联系，很容易产生一些表观上看不出来的变化，一点点的就分化了，等到你看出来的时候内在的基因表达实际已经发生很大变化了。

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还有就是，我之前用fedder-free的ESC做过一个分化基因相关的实验，做real time的时候那个峰值很不对劲的，和养在feeder上面的不一样，后来就不敢用了，还是用有feeder的来做，感觉目前对ESC的xeno-free,feeder-free的培养体系还是有些不足的，很多ESC生长必须的因子或者生长环境还没有优化出来。之前我老师说她在国外用4倍胶原包被培养皿，之后就能养得很好，但是我们做的就不行，完全分化掉的。杯勒个具的~

钻石星辰

同楼上，feeder-free培养就是这样。换到feeder上就好了~