小鼠MSC冻存及复苏问题

茶水

我的经验：PBS洗涤两次，0.25%胰酶（含EDTA)消化,培养基中止，轻吹下，离心。吸去上清，加入90%FBS和10%DMSO(细胞离心过程中混匀，减少产热）1ml,轻吹，转移至冻存管中。标记好（细胞种类，代数，日期，姓名），放入棉絮中，-80%冰箱内24小时后即可转移到液氮中保存。5 ^4 o: J! C- T6 G' C( K3 z' j, s
复苏时，38°C水浴锅中解冻（因为现在都是塑料冻存管，传热不如以前的玻璃管，所以温度较书上37°C高点），然后吸出转移至培养皿中，再加培养基和10%FBS量。24小时后换液即可（DMSO有一定毒性）。如果偷懒，3天后换液也行。