脂质体转染

zerollx

  做脂质体转染时，对细胞的代数有没有要求？为什么？

scienese

原代细胞脂质体转染后，死的很多。

cell1314

要看你转染的目的细胞是什么细胞了，肿瘤细胞的要求相对要低一些，比较容易转染。如果转染的目的细胞是干细胞需要细胞增殖活性最好的几代，一般在3~6代，而且细胞要处于对数增殖期。

daviddow

在3-10代，90-95% confluent.

hcluo

如果你选用时细胞系作为脂质体转染对象的话，我觉得应该没有问题，死亡不是很多，不过也得看转染的细胞类型。我们实验室在做脂质体转染时，原代细胞一般传代3到5次，另外，尽量选在细胞生长的对数期进行转染。这样的结果就是，转染效率也只是20%左右吧。不过最近出了一些新的转染方法和仪器（不依赖脂质体的），你可以去关注一下，据说效率很高。

zerollx

谢谢……

rainsky1314

细胞系无所谓，哪代都行，但细胞状态一定要好；原代的建议用电转，amaxa公司的不错，我们实验室就在用，效率也还行，要根据你的细胞选用合适的Kit

janeyu

细胞代数的要求就根据不同的细胞而不同，有的细胞代数传多了容易状态发生改变当然代数越少越好，如果细胞状态很稳定，传代对细胞性质没有影响的话，代数的要求当然不那么重要了。总之，做转染的细胞状态一定要好，最好处于细胞的指数生长期，至于细胞的密度也不能完全按照说明80-90%，如果细胞生长速度很快的话，密度稍微低一点也不影响。

ayeqiu

我们用的是磷酸钙转染，细胞控制在20代以内，同时要要求细胞的状态一定要好，细胞融合度在85%左右。

hhxxattxs123

回复 ayeqiu 的帖子9 D$ g- e8 D/ Y2 y
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效率如何呢？