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请问有谁做过脂质体转染间充质干细胞的请进 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-12-29 18:08 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
做了脂质体2000转染间充质干细胞,看绿色荧光蛋白的表达很少,几乎没有。请问哪位做过,效率可好
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沙发
发表于 2010-12-29 18:11 |只看该作者
做过脂质体转染MDCK,效率也不怎么高
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藤椅
发表于 2010-12-29 19:35 |只看该作者
脂质体转染干涉片段到肺癌细胞,很低
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板凳
发表于 2010-12-29 21:40 |只看该作者
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我们是在细胞传代,细胞呈悬浮状态时转染,六孔板每孔转1ug质粒。
/ K( C* X: F" |" S- {0 T3 \10cm dish(70平方厘米) 细胞长满后,消化,离心,2ml 重悬,六孔板(10平方厘米),每孔加286ul细胞。
) q9 {7 c6 c* _3 h0 R5 J) M' ?5 M& P1 T% V( l2 }; k% g
转染间充质干细胞效率较低,可能有10%。
4 ~2 [; Z, d+ w" @  s% f转染hela细胞,效果比较好。
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报纸
发表于 2010-12-29 22:57 |只看该作者
做过Lipofectamine2000转染骨髓MSC、AMSCs,效率均很低,10%左右,不过是通过流式检测的结果。
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地板
发表于 2010-12-30 09:25 |只看该作者
做过Lipofectamine2000转染骨髓MSC、AMSCs,效率均很低,显微镜下观察,阳性细胞不到1%!建议用病毒转染~
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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-1-4 14:39 |只看该作者
本帖最后由 carfan 于 2011-1-4 14:52 编辑 : q' T4 ^; U" D% x* G1 U. ^5 N% Z
; Y- F: T6 O! ]0 A! V  _
别浪费金钱和精力了,如果你的的确是干细胞稳转就换lentiV,其他的效率都不行。
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发表于 2011-1-4 15:09 |只看该作者
我们都是用lentivirus,lipo都是用在包装病毒上。不过楼主要是想获得瞬时的效果,lenti好像不是太理想,试试腺病毒也行的
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发表于 2011-1-6 20:33 |只看该作者
慢病毒 会好一些 对于原代的细胞转然 脂质体可能不大给力
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