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发表于 2010-12-30 14:20 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

本帖最后由细胞海洋于 2010-12-30 21:57 编辑

最近生殖细胞的分化，尤其是定向分化，很热门，同样也是很有难度的。曾经有实验做过胚胎干细胞体外分化形成了类似oocyte ) r: M7 [. K! Y/ A" V! x0 S! ~
* f- k, T! v4 ~* ^
（ Induction of oocyte-like cells from mouse embryonic stem cells by co-culture with ovarian granulosa cells，stem cell,2007）（ Embryonic stem cells can form germ cells in vitro, 2004, nature）以及sperm（ In Vitro Derived Human Sperm from Embryonic Stem Cells, 2009）(In Vitro-Differentiated Embryonic Stem Cells Give Rise to Male Gametes that Can Generate Offspring Mice, 2007, development cell)的细胞类型，确实非常令人振奋。有直接分化的，也有通过形成EB细胞进行分化的。另外，进行体外分化时，不同的培养条件，以及添加一些因子（BMP, RA）等，对分化起到很好的作用。. y g! O( I2 a) H' w
我们实验室在做 mouse embryonic stem cell 分化的时候，首先是hanging drops (500 cells in 20ul) for two days, then for 5 days in a bacterial dish, 然后将生成的EB细胞转至 0.1% of gelatin 进行生长，并且添加一定浓度的RA以及一些其他生长因子进行进一步的分化。但是问题经常出现，首先就是分化时期有时候把握不准；另外有时候细胞在体外分化的时候，并不一定按照你给的条件定向的生长，可能时常会出现一些所谓自己不认识的，奇形怪状的细胞类型，很令人头痛啊。不知道其他各位高人有什么高招，或者在这个方面有做的很好的大侠，请多多指教啊。