求助：小鼠基因鉴定 - 转基因动物专区干细胞之家



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查看: 30376\|回复: 7	go 求助：小鼠基因鉴定 [复制链接]

yudidiandian

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楼主

发表于 2011-1-5 17:31 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

最近在做dact 1小鼠的基因鉴定很是幽怨
WT引物58°，20微升体系，PCR电泳结果呈严重弥散
泳道里就是一片白茫茫的，没有任何目的片度的迹象
大家有没有做这个的，帮帮忙

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POPOLD

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优秀版主帅哥研究员小小研究员

沙发

发表于 2011-1-6 00:56 |只看该作者

污染

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xieqy0326

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藤椅

发表于 2011-1-6 08:52 |只看该作者

看看模板的质量怎么样？

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yudidiandian

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板凳

发表于 2011-1-6 10:54 |只看该作者

应该是没有污染，模板的质量也没有什么问题. o7 {( A" B- B; @& I1 V8 k' L
这个模板我P的DIKO就没有问题，条带特意，背景干净% G7 t& ]* e g
大家有没有用过这个小鼠的？

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hcluo

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优秀版主优秀会员金话筒

报纸

发表于 2011-1-6 11:03 |只看该作者

引物设计如何？另外，你的PCR反应体系是什么样子的啊。最好上传一张图片。

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yudidiandian

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地板

发表于 2011-1-6 14:18 |只看该作者

6 I$ ?5 F! K( e4 v( {
marker是DL2000，我的目的片段是500bp左右
从左边开始第5个是+control，第6个是-control（水）就是这两个样品+ G: T6 p# a5 t6 [2 L& n
20微升体系( J' R0 [& H$ v. X$ b6 E
10X buffer 2
dntp          2/ z2 M& q: `) T/ r, \7 a$ n
dmso       0.48 K: c9 W/ n6 I
MgSO4       0.4' N! K9 P( u2 M  E+ V
P1             0.4/ p4 u' k, {& T
P2             0.4
rTaq       0.164 W9 E  w( i9 H6 p8 Y. n+ h* L5 S
H2O       12.24

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