求助：小鼠基因鉴定 - 转基因动物专区干细胞之家



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yudidiandian

新手上路

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楼主

发表于 2011-1-5 17:31 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

最近在做dact 1小鼠的基因鉴定很是幽怨
WT引物58°，20微升体系，PCR电泳结果呈严重弥散+ K6 P. L( P( S$ D& x
泳道里就是一片白茫茫的，没有任何目的片度的迹象" @7 ?# a0 ?1 P
大家有没有做这个的，帮帮忙

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POPOLD

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优秀版主帅哥研究员小小研究员

沙发

发表于 2011-1-6 00:56 |只看该作者

污染

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xieqy0326

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藤椅

发表于 2011-1-6 08:52 |只看该作者

看看模板的质量怎么样？

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yudidiandian

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板凳

发表于 2011-1-6 10:54 |只看该作者

应该是没有污染，模板的质量也没有什么问题. {5 w( s7 H c3 U3 H k
这个模板我P的DIKO就没有问题，条带特意，背景干净' t" c( e7 q! _- W% x
大家有没有用过这个小鼠的？

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hcluo

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优秀版主优秀会员金话筒

报纸

发表于 2011-1-6 11:03 |只看该作者

引物设计如何？另外，你的PCR反应体系是什么样子的啊。最好上传一张图片。

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yudidiandian

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地板

发表于 2011-1-6 14:18 |只看该作者

marker是DL2000，我的目的片段是500bp左右5 l' r* T$ v9 @) E7 e; X
从左边开始第5个是+control，第6个是-control（水）就是这两个样品  h/ ^( k3 `7 v9 |- g: ^9 `6 Z
20微升体系
10X buffer 24 M8 _# D" d1 H5 }* F
dntp          2
dmso       0.4
MgSO4       0.47 F$ X2 B; Z" _/ k' p& [6 [
P1             0.4
P2             0.4$ z' }: M: q( q) y/ x
rTaq       0.16
H2O       12.242 z7 Q' P+ }, E# W

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