有谁分离和饲养过卵巢的颗粒细胞（graulosa cells）

hcluo

请教，有谁分离和饲养过卵巢的颗粒细胞（graulosa cells），一般你们会选择什么时期的小鼠比较好，最近做过胎儿和新生小鼠的，效果不是很好，哪位高人能提供一些分离和饲养的经验，十分感谢！

moluxingke

有文献报道吗？查一下文献，上面应该有具体方法的，颗粒细胞方面的研究在生殖领域应该比较热吧？

huozhicb

遇上同行了
# e. ]) s7 P4 q6 X# H. \  K/ X用贴壁培养不就行吗？如果你不是专门培养研究GCs的话，这样可以粗略的分离出很多的。7 X! t% t, j/ d# z" ~8 k1 |
至于养什么时期的就看你的实验需要了

hcluo

感谢了。分离的效果有些不是很稳定，时好时坏的感觉，另外，我是想培养几代作为饲养层，用来培养GS细胞的。对了，请教这位同行，你们实验室有培养颗粒细胞的吗？在培养的时候对加一些因子有要求吗？

yangpan521

曾经养过猪的，羊的，还有小鼠的颗粒细胞。颗粒细胞比我们平时养的别的细胞不同，它长得比较慢，大约一个星期才能长满，而且也只有70%的密度。不过中间需要更换新的培养液，分离可以选用胰蛋白酶消化。

hcluo

回复 yangpan521 的帖子
6 h9 j, r: j1 A' Y( k8 k
: ~6 T& o9 a6 E& {2 J& H感谢！, Q/ a& u6 H7 A. s/ z
但是有些问题想问。对了，请教这位同行，你们实验室在饲养小鼠培养颗粒细胞的时候，会用什么培养液啊，有配方吗？另外，在培养的时候对加一些因子有要求吗？需要加特别的因子吗？

huozhicb

胚胎期的小鼠几乎就没有GCs吧，新生小鼠的还处于cyst阶段，也就一个卵母细胞一个GC左右，你分离这个时期的GC做什么用？如果把卵巢消化后贴壁培养，获得成纤维状的贴壁细胞，不一定是GC的。一般比较好的方法是分离卵泡中的GCs，而不是整个卵巢，但是不知道你的实验意图，不好给建议。