关于克隆效率问题

ambassador

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douhw 发表于 2011-1-11 09:55
$ B' g/ ?0 U  W8 s* h. M. v回复 songzxj 的帖子
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8 n' {$ g; d* I0 F/ s: `& dHMC也有自身的长处与不足，但总体来说，效率换好。我所做的动物是猪。

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) C) |& a5 W5 i8 Q" Z0 p我个人觉得不足之处是需要提供大量的卵母细胞（这个在大型猪场可以提供，也就不是问题了），其他的不足之处，还请多指教？3 n2 c# S; U; {" c
3 J) H8 D4 O0 j/ Q) Y
还有在重编程最重要的处理阶段，融合前是只对受体细胞（去核的卵母细胞）进行处理？融合后的体外成熟除了常规的方法外是如何处理？

ambassador

douhw 发表于 2011-1-13 18:45 + A( O/ ~2 d  f1 a2 d0 v/ d
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; Y, o$ l3 Q1 A5 o' H! C其实我认为，透明带的缺失、以及如在制作嵌合体方面等都存在与显微注射相比较的不 ...

! ~* q* ^+ L* N$ N, T7 d! {7 ~$ L7 Q
您所说的，“尚未付诸实施”是指你们在这两个阶段都没有经过特殊处理（只是去核用手工，重构胚呢），只是用到常规的方法？有没有特殊的培养基或者加入特殊的因子？

ambassador

douhw 发表于 2011-1-15 16:50
% |: b4 q  Z2 G4 \9 u, h回复 ambassador 的帖子
/ Z7 ~  U+ ^. A$ G9 p8 K1 V' ?5 b% q& D3 [/ }: L& E
此两个阶段仅是设想，还需论证和不断地摸索。也就谈不上特殊的培养基和因子了。

  k4 ]/ x0 h7 s# K我们的成熟培养液是用NCSU-23（无BSA），感觉里面添加的东西还是比较重要的（10%pFF+10IU/mL hCG+10IU/mL PMSG+ 0.1mg/mL L-半胱氨酸+10ng/mL EGF）。