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我个人会建议先配个1M 的Tris, pH 7.0当作stock solution: ?. _8 i& F# v+ s' G
即121克的Tris溶于1L的水中,用盐酸调pH至7.0
- i2 M8 l/ k' ]2 W4 `. Y至于20 mM的Tris,就把1M Tris稀释50倍,例如1 ml tris加水加到50 ml然后再过滤灭菌, U) [; t, u9 z4 H; j6 z
缓冲液我不建议高温灭菌,因为高温下水气蒸发,溶液的浓度会改变
v+ o$ V* p& _( N. `; I5 U0 E: o9 p; E) O2 f% A9 i) H
建议这样做的原因是
) U" E6 L+ ^7 n/ j z7 `你配FGF所需用到的20 mM tris很少,一下就配个1L意义不大,pH 7.0的1M tris用处很多可用于其他目的( ] d/ d+ I+ m, ~+ \
再来就是一次配低浓度的溶液很容易出现误差
$ I% e" ]* m1 a& e$ v+ k3 D譬如说你想取2.42克的tris可是却不小心取成2.66克,虽只是2.4克的差别,却会造成10%的误差!
5 f7 Y b$ O7 ?# o G8 N这样分段配置可以减少误差的可能 |
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