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[请教] tris液怎么配置 [复制链接]

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楼主
发表于 2011-1-10 11:07 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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配FGF原液时,需要用20mM Tris 液,怎么配?配多少呢?, N& I" v" z: v
& z3 |# `3 I2 e, S+ |6 I2 r
Reconstitute the product using 0.2um filtered 20mM Tris, ph 7.0, to prepare a stock solution of ≥25 ug/ml. This stock solution may be diluted immediately before use to the final working concentration. Additional filtration is not recommended and may result in product loss due to adsorption onto the filter membrane.
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沙发
发表于 2011-1-10 16:11 |只看该作者
回复 laoxuejiu 的帖子3 y/ Y) B3 R* Q
. v. H3 p2 _1 r
tris缓冲液,用tris溶于水中,盐酸调节至所需PH,7.0,可在一定倍数内稀释,PH变化不大,然后过滤还是高温灭菌都行
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藤椅
发表于 2011-1-10 18:53 |只看该作者
谢谢,但是需要用20mM Tris 液,不需要管吗?
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板凳
发表于 2011-1-10 20:42 |只看该作者
回复 laoxuejiu 的帖子* i: E# d2 B, Z6 Q

; \  k7 a' I9 f4 t20mM啊,你就配20mM罢,tris的分子量大概121,20mM就是2.42g溶于1L中,
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报纸
发表于 2011-1-10 23:32 |只看该作者
谢谢,我化学学的很低级的,呵呵,非常感谢,好几次都是你在帮我解答

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地板
发表于 2011-1-11 19:57 |只看该作者
回复 laoxuejiu 的帖子
+ b* e& z$ O4 C4 {* B( o; A9 t1 y7 r! F  B% A' G5 g
哈,不用客气,共同进步

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发表于 2011-1-14 16:28 |只看该作者
我个人会建议先配个1M 的Tris, pH 7.0当作stock solution: ?. _8 i& F# v+ s' G
即121克的Tris溶于1L的水中,用盐酸调pH至7.0
- i2 M8 l/ k' ]2 W4 `. Y至于20 mM的Tris,就把1M Tris稀释50倍,例如1 ml tris加水加到50 ml然后再过滤灭菌, U) [; t, u9 z4 H; j6 z
缓冲液我不建议高温灭菌,因为高温下水气蒸发,溶液的浓度会改变
  v+ o$ V* p& _( N. `; I5 U0 E: o9 p; E) O2 f% A9 i) H
建议这样做的原因是
) U" E6 L+ ^7 n/ j  z7 `你配FGF所需用到的20 mM tris很少,一下就配个1L意义不大,pH 7.0的1M tris用处很多可用于其他目的( ]  d/ d+ I+ m, ~+ \
再来就是一次配低浓度的溶液很容易出现误差
$ I% e" ]* m1 a& e$ v+ k3 D譬如说你想取2.42克的tris可是却不小心取成2.66克,虽只是2.4克的差别,却会造成10%的误差!
5 f7 Y  b$ O7 ?# o  G8 N这样分段配置可以减少误差的可能
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