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我个人会建议先配个1M 的Tris, pH 7.0当作stock solution5 U$ u# n' X* H& J( N
即121克的Tris溶于1L的水中,用盐酸调pH至7.06 Q5 w8 t5 o' M+ e* J$ ?
至于20 mM的Tris,就把1M Tris稀释50倍,例如1 ml tris加水加到50 ml然后再过滤灭菌
& O$ ^5 G; E2 a, a缓冲液我不建议高温灭菌,因为高温下水气蒸发,溶液的浓度会改变! m7 O9 U/ N1 p) i' j
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建议这样做的原因是
0 U M( }' `3 ]" K你配FGF所需用到的20 mM tris很少,一下就配个1L意义不大,pH 7.0的1M tris用处很多可用于其他目的; d! [3 f2 t* I8 h7 u/ h e$ @0 d
再来就是一次配低浓度的溶液很容易出现误差4 \' k0 s4 R% k+ n$ W# V' u
譬如说你想取2.42克的tris可是却不小心取成2.66克,虽只是2.4克的差别,却会造成10%的误差!
' [; G1 D% f# f这样分段配置可以减少误差的可能 |
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