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技术方法询问 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-11 19:14 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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要研究骨髓间充质干细胞在组织修复过程中的生长因子网络的调控,用什么方法比较好?我想利用基因芯片,但不知道这种方法的有效性和可行性。求教于各位高手!!!!
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板凳
发表于 2011-1-11 20:02 |只看该作者
补充一点:上面提到的抑制剂+RNAi。
+ M' \% `2 N; L0 M有特异的抑制剂最好,没有的话就只好用RNAi了。当然后者自有其局限,比如,脱靶现象。这里不作讨论。
& P5 E% _; z4 n4 O( W' c' l盼望进一步讨论,its very interesting
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藤椅
发表于 2011-1-11 19:58 |只看该作者
首先我不是高手,但对你的问题很感兴趣,所以讨论一下。
- @. F5 E# q7 c研究生长因子网络调控的文章很多,可以找个数据库下载,技术方法也很多。$ N" A5 P& n7 p+ u
基因芯片代价太高,我们实验室也在做一些信号通路的研究,主要采用的技术路线可以概括为:抑制剂+RNAi。方法比较常规:western blotting, rt-PCR.
7 N/ G  P8 u0 h/ W+ f6 d当然检测各个通路中蛋白一系列抗体必须具备。6 N; w  B4 Z! C
其次,是不是可以用2D检测一些蛋白的差异表达,当然银染就不够了。还是要用好抗体,最好是荧光二抗,分辨率好。
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沙发
发表于 2011-1-11 19:56 |只看该作者
基因芯片当然好,就是有点贵。可以用病毒转染超表达的方法呀
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