请问如何进行EB分化为三胚层后的鉴定，主要鉴定哪些标志

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三胚层的鉴别& y% V& s9 P; n0 G7 `, E
  1、形态学观察：ESC在不同的发育阶段有不同的形态，在11天时则出现典型的三胚层形态，可用相差显微镜观察。
' q  g% A) j/ p/ [6 w* N1 U   2、三胚层中表达的特征蛋白的检测：免疫组化实验检测，EBs分化15d左右, 中胚层心肌细胞特异性标
7 K/ C: Q; y" Q3 ~  {( a志蛋白c TnT( 图9) , 外胚层特异性标志蛋白Nestin% }1 D- M. G* t; h; n; l8 Z9 H& q
3、三胚层中标记基因的检测：在ESC发育各阶段提取总RNA,个标记基因的引物进行RT-PCR，电泳鉴定片段大小来检测是否有表达。
4 R$ s* m7 E2 f" ^     内胚层：特征性基因转甲状素蛋白、 甲胎蛋白在EBs 分化的初期不表达,从分化的第7d 起开始表达% ]4 ]; S# l1 ], ~
    中胚层：波形蛋白等( V$ O) h) U* Z2 z5 h# k- b
    外胚层：巢蛋白等. \# z- ]& h) R* F
   具体你可以看这篇文章：体外分化过程中小鼠拟胚体的细胞学特征及基因表达模式