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kongxiaoling 发表于 2011-1-17 09:56 5 W: v, x: z ^$ u
我用0.1%胶原酶消化了16小时 是不是太长了 请教有成功经验的同学 你们的具体方法,请指点一二
/ m- A7 S. b5 [* l) [& r* O! Q1,消化时间是根据你组织剪碎的程度有关,不管是剪碎组织还是平铺组织去消化16个小时都不算长,本身胶原酶对于细胞没有什么伤害。如果剪得碎的话4个小时就足够了,肯定会有残余的大块组织是消化不干净的,可以离心去除。
# k3 B, p, A4 y! H. K- X2,消化完粘稠是很正常的,可以用pbs或者ns去5倍甚至10的稀释,3000离心20分钟,弃上清,再稀释,再离心。/ y, Y u& P: R. p5 B3 T9 X4 S
3,可以加入透明质酸酶同胶原酶一起消化组织,这样粘稠度就很低了, |
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