成骨成脂诱导液的配方

tangyvhuang

诱导脂肪实验试剂：, Y" J0 m0 B. l2 V6 |0 h
: A. W0 i, _' T9 n" X# l
诱导剂：（DEX  1um/L,消炎痛 200um/L,   IBMX  0.5mM/L,  胰岛素10ug/ml）* K) i+ O) F/ o# d  I  H, t
固定液：10%甲醛) M, B3 S/ A" \* F
染色液：油红O 0.5g 溶于100ml异丙醇中。做为储备液室温放置。 临用时取储备液6ml加入4ml蒸馏水中。过滤后并在2小时内使用。" T: S- x* k' X! r4 y
: `3 Q: C. g& B) M# {. q) v1 f& B
操作：1，固定：吸弃培养液后加入固定液5min.
7 H! J1 |2 W" n) {, U% E0 \# t. a      2,吸弃固定液，加入染色液15min后水洗一次镜检观察
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tangyvhuang

诱导成骨实验试剂：
3 `/ l: z9 k  L8 h) t诱导剂：（DEX  0.1um/L,  β-磷酸甘油 10mM/L,   2-磷酸Vc  50ug/ul,  ）
) E! N, a+ h* P4 ?4 Q* l% d, N: O固定液：甲醛：甲醇=1：9混合， 4摄氏度存放。
6 }2 P; M3 b7 T4 L5 m0.2M丙二醇 ：丙二醇2.103g加入蒸馏水100ml ，4摄氏度避光存放。  s* ?( G; |* D, h, H& F0 d) T
0.05M丙二醇：0.2M丙二醇12.5ml+ 0.1N HCL  2.5ml 蒸馏水35ml, 4度避光存放。& f6 R) O7 e* Z' T, n& Y
  基质液：α萘酚磷酸钠 35mg+坚牢蓝RR 35mg 溶于35ml0.05M丙二醇中
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& T" {. D3 z) P: q  ~( Y操作：1，固定：吸弃培养液后加入固定液30sec 冲洗，晾干。
$ r7 {/ Q* `$ E# s: ]; A4 v      2,基质液用NaOH调节PH为9-9.6，过滤- [. M! X( P9 D# [6 U
3，染色30min，最好是13摄氏度水浴
. m3 g0 g7 L6 @; b6 U1 E2 s8 ]7 j4，冲洗晾干- ~- W6 H% Q8 y$ b5 I7 W7 H/ a