绵羊脐带间充质干细胞，无文献摸索-Ⅱ 细胞诱导分化鉴定

tangyvhuang

说实话，做过诱导，但是也不精通，更没做过绵羊的，# p% x5 R# d8 t! v0 j$ {+ u
第一个问题，那个融合好了的才去诱导分化，我做的都是80%时候去诱导的，没有那么满，脂肪的诱导比较快的，两天就看出来油滴出现，细胞少了好多，大戒指的样子很明显，第四天我去染色了，结果还不错。成骨的诱导有点慢了，但细胞也是在生长的呢？我还传了两次代呢期间。

tangyvhuang

油红O 是红色粉末，很好买的。染色很方便的，神器用不到，但是你得用圣器盛着，
+ s2 t- W5 W' s8 [我们是用0.5g 溶于100ml异丙醇中室温放置备用，用的时候直接吸取6ml加入4ml的蒸馏水混合好了之后过滤一下用于染色，+ l6 E* w5 ^9 f& M' G' k& F
细胞先用10%的甲醛固定然后在染色，染色15min后冲洗干净观察就好了。
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9 F. Y' X. E: Y' {: g% _- X对于成骨的诱导染色，一种染色方法就行，我们用的是α萘酚磷酸钠 35mg+坚牢蓝RR 35mg 溶于35ml0.05M丙二醇，这个染色液去染色30min之后冲洗观察，也是先10%的甲醛固定。& o6 N6 @  g% D
! _- M- u; J3 y  g1 }
不用其他的设备了吧，有个显微镜够了
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tangyvhuang

诱导剂加的东西都一样，就是地敏的浓度有差异，不知道

tangyvhuang

金戈 发表于 2011-2-19 15:31
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- p& i6 W! l1 x' ^- t+ NTO 1: 染液不需要无菌。

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都帮我说了，谢谢，：）