求助：脐带间充质干细胞组织贴壁法培养问题

susuloveq

脐带间充质干细胞组织贴壁法培养4-5天后，观察看到有许多的圆的细胞贴壁，我看到有回帖说要等十几天才长起来，我想知道现在的圆的细胞是脐带干细胞吗？还有中途需要换液吗？

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我们组织块直接培养用眼科剪把组织剪碎，碎成小块，好多文章上说倒置几十分钟到几个小时的都有，反正要放置一段时间，让组织贴壁牢靠了，反正我们怕贴壁不牢靠都是倒置好久以后才加培养基的，细胞一般要10几天长出来，三天一换液，前几次可以半换液~

干细胞工作站

脐带组织块培养MSC很省事的，组织块剪成小块直接放在培养皿或瓶加适量的培养基，5%血清，关键是培养皿与瓶，玻璃的出来的很慢，塑料的好些，要是处理过的塑料皿与瓶一般三天就出来了

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细胞爬出或爬不出和组织块是不是贴在底下，没有太大的关系，这和脐带来源也有很大关系，有的脐带你把羊膜剥去，再出去血管后基本没有多少基质成分在了，肯定细胞就会少。但是再少也因该在10天左右就有。我们做的4天就看到了。如果血细胞太多了，那在剪碎之前应该好好清洗脐带，处理干净后再开始分离。然后还应该摸出一个合适的接种浓度才对！" c1 v1 v* }# y  ^4 d

deshenglll

谢谢

susuloveq

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  B! y5 ?* u  ]0 I- j$ G
5 g1 x* v+ t6 Z- m) p& q. }+ x小块在培养皿底拉丝?怎么拉？

柏林小杨

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) U( q7 [/ A# O9 n8 u7 G. A7 |最起初加培养基的时候，就是在组织块周围加一小滴啊！

柏林小杨

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: F, x' z- c( F$ f
6 H* F2 V5 H/ b好的    我今天试试！

tangyvhuang

柏林小杨 发表于 2011-2-22 16:28 ; S+ Q- c& I0 |# x. F4 G% ?
回复 susuloveq 的帖子# F7 ~. E& `0 u, j0 V/ W

0 a5 ]1 \; P7 D, t: m3 }1 T0 T* E请问你的组织块是怎么处理才贴在板子上的，为什么我的组织块都飘起来了，而且20多天 ...

# ]. I- e; z3 L, l9 k' Y对于脐带组织，没做过组织块的培养，但是其他组织都做过组织块的培养，说说大家讨论一下吧，我一般是小块在培养皿底拉丝，总有一块会贴上，然后再组织块四周小心的滴加一滴培养基，放入培养箱，第二天再不加一点培养基，如果没漂的话，就多加培养基，三天换一次液吧，十来天出结果

deshenglll

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9 J* C6 i( h7 }  T6 U3 w
是不是培养基加多了啊