急问：G418加的太多，会有什么影响？ - 实验室综合讨论区干细胞之家

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lorey

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楼主

发表于 2011-3-2 09:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

最近做筛选试验，头脑有些晕，结果把G418加措量了，应该是500ug/ml。
我开始加成5mg/ml，筛了48h，又加成10mg/ml，筛了12h，今天赶紧换成了500ug/ml的了，换液前看细胞还很多，不知道会对以后造成什么影响啊？

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优秀版主帅哥研究员积极份子小小研究员金话筒

沙发

发表于 2011-3-2 10:26 |只看该作者

G418通过抑制转座子Tn601，Tn5 的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素,neo基因编码抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶,使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长,所以抗性筛选的原理告诉我们，如果G418抗生素加太多，需要抗性细胞产生比较多的氨基糖苷磷酸转移酶，为此细胞可能会在这方面消耗过多导致生长过慢，甚至有的细胞因此而死亡，故总体来了，G418加太多了会导致细胞生长缓慢，太多太多会导致细胞死亡！！