急问：G418加的太多，会有什么影响？

lorey

最近做筛选试验，头脑有些晕，结果把G418加措量了，应该是500ug/ml。5 E6 f. H5 k1 r
我开始加成5mg/ml，筛了48h，又加成10mg/ml，筛了12h，今天赶紧换成了500ug/ml的了，换液前看细胞还很多，不知道会对以后造成什么影响啊？

懵懂干细胞

G418通过抑制转座子Tn601，Tn5 的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素,neo基因编码抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶,使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长,所以抗性筛选的原理告诉我们，如果G418抗生素加太多，需要抗性细胞产生比较多的氨基糖苷磷酸转移酶，为此细胞可能会在这方面消耗过多导致生长过慢，甚至有的细胞因此而死亡，故总体来了，G418加太多了会导致细胞生长缓慢，太多太多会导致细胞死亡！！

张也行

加太多阳性克隆都被你杀死了。出的克隆估计很少了。

lorey

回复 懵懂干细胞 的帖子3 A# u0 s, X0 G
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谢谢，可是现在还没死，我赶紧换液了，那会不会挽救一下呢？

懵懂干细胞

回复 lorey 的帖子0 ?; |7 k/ g$ l8 J% u( O9 j
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生长状况怎么样啊？长了很多么？
+ \% `9 n1 y: W# g0 P换液了应该会好点的！
+ x; I: J4 E- y* O' D/ J3 L! W( Y不过对细胞的状态该是有点影响的吧！; }! v: N- v* e% f% r
祝你好运