消化除了用胰酶还有其他方法么？

taoli10000

实验室消化细胞一般都用胰酶，最近在考虑做干细胞的分化，需要做免疫试验，要用到PECAM抗体，但是看了一篇文献讲用胰酶消化对这个抗体的效果会有影响，真是一个打击啊!该怎么办呢？还有其他的消化方法么？

是鸟就要去飞

皮搋子 发表于 2011-3-5 13:50
& a( i' k4 e- Z- R) N: G* |/ `( ]回复 ambassador 的帖子
8 [5 m1 L4 c2 C- i/ ^0 \2 {5 X
9 K" u9 v0 W" j1 k0 F能啊，以前我们做的时候就采用低温法，低温会造成细胞贴壁性下降或漂浮，直接就能 ...

2 U2 U# p8 o7 Q. F; L4 D* P3 |/ T
有相关的资料说明这个问题没人1 d) J8 X/ L5 ^5 f4 g

ambassador

皮搋子 发表于 2011-3-5 13:50
* }+ p, ]/ V) @- Y回复 ambassador 的帖子5 ~: n# U7 \0 n9 ~- a/ @' q) L% B  c' A

1 z  w8 L( j9 a2 z3 N' x. d能啊，以前我们做的时候就采用低温法，低温会造成细胞贴壁性下降或漂浮，直接就能 ...

- [1 R: N' F+ F5 R1 x" f低温时多少度？？时间要多久？还有需要用枪头吹打把细胞吹打下来吗？吹打多久时间？

皮搋子

回复 ambassador 的帖子
. ^* O* r/ z, s: E' c/ N# r
! Z/ [+ c- L/ e4 J# d$ ^* k6 c能啊，以前我们做的时候就采用低温法，低温会造成细胞贴壁性下降或漂浮，直接就能吹打下来了

fengxuan

细胞刮

linchee

cookiezhang 发表于 2011-3-4 23:36
4 X4 Z5 z9 h- [- TAccutase细胞分离剂

3 o4 B# f0 o4 V$ P; M这个貌似可以的吧，没用过

linchee

我们这边有人是用胰酶消化以后再用细胞刮刀刮的，单用EDTA怎么会消化的了呢？它只是一种金属离子螯合剂呀，贴壁细胞的胶原蛋白什么的还得靠胰酶来消化吧。直接刮会不会损伤更大啊

cookiezhang

Accutase细胞分离剂

ambassador

皮搋子 发表于 2011-3-4 21:07 7 X4 `8 \2 O& i( d7 a
用细胞刮刀是个好办法。
* O& t( \* ?3 y! ]( C你也可以试试这个方法：
, v0 m1 S; z' @9 T% O+ r' W1 Y1.弃掉培养液，用PBS洗2次；

7 z+ `# k% G( `- y( [
用PBS不停地吹打就能消化下来吗？？, T5 m0 t( M: X" f- w( p
9 r3 _( p# `+ z, }" A- L% {, {) A' x
另外能传一张细胞刮刀上来看看不？怎么个操作法？

tangyvhuang

细胞刮刀