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[请教] DNA酶切后,不立即电泳,在4℃放一段时间再电泳可以吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-3-6 19:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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DNA酶切后,不立即电泳,在4℃放一段时间(2-4天)再电泳可以吗?已经混合好molecular weight buffer 和 loading buffer,哪位大侠指点一下
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沙发
发表于 2011-3-6 19:38 |只看该作者
呵呵,先不说酶切效果怎么样?DNA在4度放置就存在降解等方面的风险,这样的回收片段极其有可能对你后续的片段回收和链接造成影响,而你自己会苦苦郁闷找不到原因。建议还是不要放这久,实在不行,你可以重新酶切撒
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藤椅
发表于 2011-3-6 19:38 |只看该作者
呵呵,先不说酶切效果怎么样?DNA在4度放置就存在降解等方面的风险,这样的回收片段极其有可能对你后续的片段回收和链接造成影响,而你自己会苦苦郁闷找不到原因。建议还是不要放这久,实在不行,你可以重新酶切撒

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板凳
发表于 2011-3-6 19:50 |只看该作者
回复 千细胞 的帖子
3 ^3 T9 e$ S' f. x& s; X+ _4 d7 N8 X7 Q( O' l( r/ k
多谢指教: O1 j* l5 a8 i2 |3 @7 @! \, s

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报纸
发表于 2011-3-6 21:59 |只看该作者
你要是只是鉴定一下质粒什么的,那其实没有问题。4度,各种酶的活性都减弱了。但要是如楼上所说的要回收片段。最好还是立即做。
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地板
发表于 2011-3-7 07:52 |只看该作者
我建议如果酶切之后不立即电泳的话,最好是放在-20℃或-80℃中,这样可以防止DNA被破坏。4℃中虽然酶的活性较低,但是如果长时间放置,对DNA还是会产生一定的影响
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7楼
发表于 2011-3-7 09:53 |只看该作者
放个2-4还是没什么问题的,但是长时间就会导致降解
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8楼
发表于 2011-3-7 12:18 |只看该作者
我也学习了,嘿嘿

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9楼
发表于 2011-3-8 10:47 |只看该作者
回复 张也行 的帖子) n. e/ e; P5 u- ?

4 f8 L5 Z- B9 J7 P+ cthanks so much
/ ]/ V6 o# L) ~) B$ k

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10楼
发表于 2011-3-8 10:47 |只看该作者
回复 fananran2003 的帖子  X1 c/ Z1 R& i6 r
3 v* F- D# @% }
你以前做过吗?$ b1 _' ?2 Z9 M* C, s
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