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[请教] DNA酶切后,不立即电泳,在4℃放一段时间再电泳可以吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2011-3-6 19:10 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
DNA酶切后,不立即电泳,在4℃放一段时间(2-4天)再电泳可以吗?已经混合好molecular weight buffer 和 loading buffer,哪位大侠指点一下
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沙发
发表于 2011-3-6 19:38 |只看该作者
呵呵,先不说酶切效果怎么样?DNA在4度放置就存在降解等方面的风险,这样的回收片段极其有可能对你后续的片段回收和链接造成影响,而你自己会苦苦郁闷找不到原因。建议还是不要放这久,实在不行,你可以重新酶切撒
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藤椅
发表于 2011-3-6 19:38 |只看该作者
呵呵,先不说酶切效果怎么样?DNA在4度放置就存在降解等方面的风险,这样的回收片段极其有可能对你后续的片段回收和链接造成影响,而你自己会苦苦郁闷找不到原因。建议还是不要放这久,实在不行,你可以重新酶切撒

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板凳
发表于 2011-3-6 19:50 |只看该作者
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报纸
发表于 2011-3-6 21:59 |只看该作者
你要是只是鉴定一下质粒什么的,那其实没有问题。4度,各种酶的活性都减弱了。但要是如楼上所说的要回收片段。最好还是立即做。
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地板
发表于 2011-3-7 07:52 |只看该作者
我建议如果酶切之后不立即电泳的话,最好是放在-20℃或-80℃中,这样可以防止DNA被破坏。4℃中虽然酶的活性较低,但是如果长时间放置,对DNA还是会产生一定的影响
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发表于 2011-3-7 09:53 |只看该作者
放个2-4还是没什么问题的,但是长时间就会导致降解
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发表于 2011-3-7 12:18 |只看该作者
我也学习了,嘿嘿

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发表于 2011-3-8 10:47 |只看该作者
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" Q( E5 N- i7 D) G& I* G, I1 d' b' [
thanks so much
5 S: _* I+ K6 G: {

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发表于 2011-3-8 10:47 |只看该作者
回复 fananran2003 的帖子; W% |6 S: k. V$ t; ]

% E  h. p' A, ]5 X9 _你以前做过吗?
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