求Hela细胞成球培养条件

深海寂寞鱼

to amosummer：
9 e% I' W5 S. F6 i$ ?) h
% k3 [  a- |- [* k9 C    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？
1 N) g5 m" g* R& @. t, i. a
' C+ ^9 q" Z0 o  o0 h    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。
* J$ x7 Z+ S/ t7 g
+ s; c7 W3 h( C2 u" B' j" t    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。
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              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。
5 p8 i+ ]' L: b  M5 L7 ~8 l
! X( z* z" r0 Z, b+ `9 p) H     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。4 D1 F# V' O. [$ }) Y. W
           0 H4 P! f& W# L# k3 ^& P1 `* X
               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。
) e. ~! C& U; J1 \5 `5 }( d9 k3 u0 y: q
               但有两方面你必须清楚：% G& N  _( h0 ^# G8 H9 R) N+ `

/ N6 S: `! p% U6 Y0 B$ i/ k               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。; |' b0 M, L& k, V5 j. b$ b3 @

/ ]; Z8 |. x3 X# L; X" x               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。
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     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子7 [3 u. e# @/ P& v
! w" ?0 p: P1 Z. H5 y9 A) [
你太客气了。  R5 a7 R$ C  N' t8 u, @
! ?% n# e) L; O) M3 C
能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。
! @8 _9 E, v, J+ D8 D% O6 W* m* x+ d+ i3 L9 O& p' W" P, i
欢迎继续交流。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子& v$ Y+ `- W8 V7 Y6 Z+ g. A
3 F2 j. Z& e, V- q
to Rena:0 p9 h" M4 V3 Q" v) a0 X* l
. c2 v+ m% D- i& p
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
* A" M; r; n& r! Z) T
* n6 l3 P, ^/ Q    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
. R; N# G" U* j0 }/ g; w0 C. [5 P- F$ a8 a, L" i& e
    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子3 E* f1 w, W- ~4 a6 i' [
; h. C1 ^3 D. u
to Rena:/ Y2 d) P: F2 j0 u- c: V8 p4 J

% U. x1 D3 ?9 S" N; u    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。; u# P: Z2 d7 M0 x" ]1 R" Q- E
7 I) f4 s( o& [, `* ^5 |
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
6 g- U% q1 x0 }
$ {' @( l8 D* U    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

to Rena：% o( ^6 H4 Y7 z" @: R

4 S" t' W. {6 T    个人建议：2 |& w6 L" e8 y# N" d0 h
" ^) v6 ?2 a( g0 x& G
    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。
9 C3 G3 |+ ~' i0 }
& h" H3 V' f3 U- V! _* P1 I1 l+ L1 ]) \      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）
/ g' E1 f! d6 @. A1 n* H; T" v% K+ e$ [8 P, t+ h
       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。6 n+ X) @* w  k2 @# Q

1 W. K0 Q! z7 a7 X: j    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。
0 }9 Q: y; L8 _) y7 o6 T% R* W* S; t
- J8 k1 f; b+ I4 R- O( T: ?         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？
  c2 f9 _2 q7 V# r- L1 Q2 d/ V$ W  B; ?) s/ S3 s
         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？- h5 A* m4 {/ ]4 [% {
7 B2 N% w+ g7 \$ L: X6 U
         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？: U: ~5 T, {& A& Z6 Y  t: O! P
3 |; j9 e- X$ G1 m. @! T- w; t
         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。6 q: g7 f1 x( A( b2 i
$ B6 _# ~3 [- V3 K0 h2 A
祝实验顺利。

深海寂寞鱼

回复 lxn90219 的帖子
! v, a8 m! j5 u' a- |* Z7 X. z9 J0 @5 W3 r
/ @3 `4 a& T* a/ D$ {! x
  To lxn90219 ：
5 @; h1 [' {( p& ~
; M- M" }1 [3 i$ d5 j# F' z  不知道你是看到哪些文献中使用HeLa进行Tumorsphere Formation assay的？可信度是否很高？
: @+ Q$ Y( @( O& }5 W! ?7 @& {' R6 w1 ?; H: I4 j9 l  f$ W& P7 v
   如果你特别想进行这个实验，可以按照文献中的方法试试看。! Y8 M% B8 X- ^% t1 S% s' n

( m* S' [; S* {: ~: G+ z) a$ B6 j# O    我个人不是太推荐。

深海寂寞鱼

回复 Tim 的帖子5 U$ w/ \2 B  O' J
" N# m( ?4 P5 J! B6 f# B
' i9 R3 p  f5 n2 U
  你可以尝试文献中使用较多的：（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件