求Hela细胞成球培养条件

深海寂寞鱼

to amosummer：
6 J" T2 S1 t( g- S9 Q4 m* j5 `4 i& Y
; G" }& S. E. y$ n7 |    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？
/ q1 w0 C4 n0 m" r0 y: k  A2 x: A+ R+ {+ l6 s0 z) s0 K  c
    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。% q( O- n0 w1 X5 {& n5 X. ~! Y

- X" |% J1 {. t4 }0 j9 U    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。
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& c" U: a8 u5 A! q. m6 u% g( N9 \4 l              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。
2 z: z: Z# w; H5 v4 B2 |( P  Z# T
" |0 X0 J1 ?& y7 }+ E  _0 `2 k( F/ O     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。& v: P0 x( G$ F2 Z4 o9 \
           1 Z# B. z4 N- N- ?
               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。
5 j5 Y, Z5 u$ @" L7 M3 W
+ B( ?& K9 D7 Z' `" I# @4 q5 L" [               但有两方面你必须清楚：
6 f+ [  b  R) e" m7 O% V% Z3 A$ M6 g0 A+ A" t
               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。) f; E$ q3 g" q  t
( C' }- G1 y; J6 A
               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。
  l6 A  X3 d% f$ C- |8 m; Q
/ Z, i) |/ C0 q8 R0 y     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子% h" f0 s3 S& n( B4 o+ V" d" q; o
# ~% s3 S5 @2 M* N& a' I& k4 Q4 q
你太客气了。
. q! \8 s. p- L8 Q& V7 C! Q& z! x$ z( o9 \1 B: }  ~& ~
能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。$ p$ S0 B! z1 u# F  s- l

# P, s" {. R  i, g8 t欢迎继续交流。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子
, C. q$ c1 t% V0 N9 K
2 ~# H. y5 I3 G, U' H& gto Rena:( E& _$ [4 I+ g5 }3 w

. q% ?1 s- ]4 S2 B9 p' F6 x    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。- ~. u$ C0 A: E" P/ m
1 [" ?, s; c: J$ R& q
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
/ ?5 V0 G& |- J9 V
0 I8 r- d# L4 z    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子: l9 U+ J7 [6 D

" A. V8 O# R: B" u7 y  l0 sto Rena:/ p2 w& W' D9 n+ o
) e- w2 i# [* @3 X0 z9 |: s
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
  a2 h. s! Q% k( c* z
: p6 f9 X5 d/ M/ R- X    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
+ q5 s+ x' Q$ v' C/ O! A6 s# U# J
0 V9 A  L# P; u5 n, {9 R+ r: s9 g    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

to Rena：
" n" g- T3 F& v5 Q
0 m) \2 r( B# y4 P* v! n* e1 E    个人建议：
7 E  z2 p; k5 A4 y
1 C; M2 Q6 W" _    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。
) N! P" {$ A/ f/ B& t$ `4 ?% J6 D- t, f+ K9 e
      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）, w9 n0 m1 Q/ ~* W4 X- o: ^& V

- s$ W) M8 H. N       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。+ R2 ?$ S0 f0 [& E
' Z) X  {+ A% f
    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。' M1 D8 G. X, `9 P* e+ V/ B
1 H. K# s1 K" X) o
         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？
" i# A7 ^6 d0 U: `% i  D2 g9 {1 [% Y# s% C
         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？$ O$ I  i/ ~; Q) E2 |

2 ]* V, E# l* a( K         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？: D9 M! O) C$ r

' W9 \  @/ `% J7 `' \) \# R( Q* `, b1 X         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。
& Y0 Y2 v8 c% U8 a* S
6 O8 T/ Q3 c. H: s+ K$ N祝实验顺利。

深海寂寞鱼

回复 lxn90219 的帖子% f  q/ ~7 m: O4 g' w
. g4 n. o4 n# \+ ?3 Y
+ B) i6 e. U  ]6 _2 F
  To lxn90219 ：" W3 B, ]: \! T6 ~

3 q% c& @& [) E' w6 f# P  不知道你是看到哪些文献中使用HeLa进行Tumorsphere Formation assay的？可信度是否很高？
$ a6 l8 N+ m5 f2 c
8 b  z2 X8 |& \* S4 D   如果你特别想进行这个实验，可以按照文献中的方法试试看。) W. T0 U. c& p& a
) V  h" k1 p! z: x3 Y- F
    我个人不是太推荐。

深海寂寞鱼

回复 Tim 的帖子
% n1 o) Q  L2 H1 e, N1 H' g; x; n5 q9 a$ ~) ?: v( c
9 [/ |/ m9 ?: C1 @
  你可以尝试文献中使用较多的：（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件