求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

to amosummer：* ~6 z! T. {) Z, |) r- A
9 n. a( K: }4 x- `
    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？2 ^" E8 {1 m8 ?# u

4 w3 k7 c1 N, ^$ j& J" G+ m7 L    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。! S$ n+ A: J' c1 P/ l

$ j) ]  s- ^8 N% I: H    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。4 F: ]& b- x0 t- ^0 D

: H' Q6 V% ^7 i3 w/ [              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。5 S6 z- l1 W* s4 U
6 F( v1 L1 z* ~9 W
     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。
! M& p, s7 U% ~; t/ A; N9 Y           
6 j4 i% ~4 ]/ S. N               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。3 H4 F7 |, N$ k+ m1 L8 R$ d

% S' q( o& Q% |# H' k               但有两方面你必须清楚：& z$ N8 f5 R2 @- |( u5 P/ Q  C

, Y' B2 r0 s: z. h9 V9 {, s; y$ _               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。$ i8 _( h, |) e/ L% S+ a+ N

5 l$ n/ s7 _& A; e! y/ @' n               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。& o0 k2 o7 Q3 M, h. Y* @/ d

$ \+ j7 i% Y1 |: D2 L; L7 @3 n" R     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

amosummer

回复 深海寂寞鱼 的帖子8 n6 w. G) T3 J; }) r! _

5 Z2 K4 z0 ]7 t' r! d非常感谢！你的信息对我帮助很大！

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子9 Z8 d3 R/ g/ o
% b! S. U0 W# T+ t2 ]
你太客气了。3 m6 x% p8 J9 ^% B/ E3 v

* r6 U4 a1 c7 s1 [$ e& h能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。
' s& r3 w9 d/ m# C: A
; _$ G: i% S& o8 E: B欢迎继续交流。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子
+ O% N5 L; Y* _2 x8 M6 R% X/ A
$ U5 w/ a8 h) O/ S3 |7 G  ]你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子8 O5 x# U7 a+ A, j) S

8 A$ U, c* V( v& S( I7 lto Rena:
2 z0 a% `% c+ y, V+ h* x; S! g+ j, b/ p& [& }1 h, Q7 I1 e
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
* S5 j: I6 s" f- c; z3 C% v, C# d7 }& `0 B4 ?6 t( o, {
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
; q8 L) t  W6 b# Z  c9 R; A& {8 s( T/ T3 G
    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子
& D3 `! ^' \& Y; [* S) X& G3 _* a- f3 S$ e  h5 X# B
to Rena:6 _4 J. S/ |1 }" L9 o

: p- m6 ~+ F/ t4 N; I    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。. h! @) n9 J4 Y3 g2 k& d
5 ]8 D  T# J7 T7 V
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
7 k9 {3 x: d) @- O2 J4 i/ b( f
( ]- m: f" O6 a  b# v9 ~    欢迎继续交流，共同进步。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子% H0 R/ j) e. y2 r; g
% k3 l0 S+ y7 K0 |) a) f
谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

to Rena：# \( Q: E- K9 e  S

4 E6 n+ f0 _, G( C5 J    个人建议：
4 Y/ `" F% |! \! C7 k
1 s0 O  h) Z/ d  `$ |    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。# Y1 x5 u& }$ D0 v% \
. E' g3 L. M9 F) f
      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）
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       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。
# e/ m, Z+ e6 _: ^4 J  t( m& F& A
    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。
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         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？% a9 L& b4 l* l6 n; Z

- l, Y/ g/ i5 t         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？
8 p2 H7 @" B% I) i2 v; j" S4 G
% V  z. Z' O" I         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？
) B& U5 Z0 O, R6 f9 p
! n. |2 d# J9 B/ A1 N         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。
0 @  S6 E6 p( b/ K2 |1 e" }. _) f" ?
祝实验顺利。

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回复 深海寂寞鱼 的帖子2 _/ I0 \- Z. I0 m8 f& w; ~3 s& I

/ w1 w- h6 ^: H" X8 j我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求