求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

to amosummer：
* I$ i/ i5 g6 Q2 c' z! @6 \; Z' B  Y9 o5 u. {! {" O0 d) j
    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？7 X4 b  A  @2 T# \$ u0 W1 y% N; I4 }
+ V1 |( B" X0 A! _
    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。
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    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。
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7 O% p) f5 |6 F0 A5 E              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。3 d: @% r4 H& R7 e3 q3 T* u1 W5 Z7 v& t
4 [9 M! }5 i. `. I( Z
     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。  N0 L! Q# {& b9 V7 M6 x3 M* s
           
8 @9 o( ^; M9 ~6 V' j$ o( Q; Y9 W               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。; E3 {  [$ O0 w4 x2 u+ V$ q1 T

% X+ u4 v" L6 |7 ^- b               但有两方面你必须清楚：
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               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。# n8 K' q1 a: u0 W" K; W
4 e+ ~+ g! O8 M' |
               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。
  m7 s* x2 M/ w2 ~0 }2 S. j, f3 m. J6 W
     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

amosummer

回复 深海寂寞鱼 的帖子3 I( z$ w2 R( ]# [' @9 ~3 R

' ^7 t  I% U0 F* u- |非常感谢！你的信息对我帮助很大！

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子
. ?) k! _( l$ _5 k- G$ E1 Q9 f9 [$ U& v% j& {
你太客气了。
' J+ r9 J( V1 v3 y1 k: n( v% J
0 B- F7 ?6 C1 o4 L2 ?能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。+ e8 y: P7 @, |  j: A. ^

* W; A1 N6 s% y7 r欢迎继续交流。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子
7 j- X0 u5 ?9 e5 S3 S
! A! ^$ w# e0 R: l; @9 Q你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子
8 |5 Q# w- h" M. B- U
: P; O% z, R) ^+ w8 _7 ^to Rena:' y$ Q9 ^6 |" N: G+ C2 l& v
( T# L  @3 J* H. C% d
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
# l1 G2 C0 b$ p. m2 P3 {' g5 q% h- A# c. T) C+ Z  M; v( T
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
! K. L: K6 L  v2 ^( [- R$ v5 l8 d5 Q# @! U- F. R/ t& |; V
    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子) Z5 k# m* g/ }' B" [

) R4 Y+ J5 M& Y! `2 U/ u% D3 m* ^to Rena:
3 c3 T" {& k7 A
+ \8 ~% `+ u& C7 ?  p' ?/ z    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。$ c; W) n( c; B, z$ d5 Z

& f/ o* D% w) q6 q; w1 M) a    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
9 p, o: A+ i! V9 Z+ {+ D" e
7 z. {& u7 X: `- z( b; z    欢迎继续交流，共同进步。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子; d( g& `1 m& j2 ^
& ~) G5 a: N8 M: c
谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

to Rena：
6 `% R; U- f( W8 v. N% U( u3 Y. b9 w. L7 \! ~% ]
    个人建议：  n) c  Y$ z: F

% S7 P4 r  G0 C8 C    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。( f- T$ A% `9 i  h

1 S' @6 K+ W) H1 ~      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）
8 R3 c( m4 ?# O1 Z, z1 [% O$ P% z! H1 x, |* x& ~& k5 }% e
       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。5 c2 R) \$ k8 a& s9 {3 w3 }
+ \% {4 C8 d! z7 ^+ _6 Q
    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。# T% C( @, V, L- T: d
0 |$ I( F" r/ S7 r; ~0 U* {% P
         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？
. V5 z5 m- \$ E4 r5 b1 a. i4 z. |1 j' H5 S# N( c
         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？
' h/ j% ?7 ^8 r/ @8 t% F
* I0 a3 b9 d- p2 E. f  z         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？7 T* V, M! j1 q$ F' q! `# v
5 a& ?7 v; N, o
         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。7 S# B6 k; i4 q
; y7 ]0 k$ v& M8 D
祝实验顺利。

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+ y/ Q- D, D0 m9 o2 r
# K6 F: ?/ ~6 s) s/ r我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求