求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

to amosummer：' Y# |' T* R! e2 c+ N$ Z
- [- ?% G6 D: i" U( H
    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？# c  I8 b  s+ l, {

) S/ \) _, q  v2 J5 T  c* N    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。( @0 C" U2 h, H- l" ~; y* @( ~

4 {( ~  f2 ?. s; l    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。: M% t7 j( c, w( c# A6 R

+ A4 ]6 r  O6 B+ y( z) ?              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。% w: x7 t* V7 l% Y/ Q% Q

* a2 N) t  o0 n     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。
) v$ z) i" C3 U; y2 x3 \$ z$ q           
7 }& u2 B' x. V$ V- S  s- e               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。
: v; f. b# X  I$ t; A- |# ?3 c7 R0 K+ c5 |
               但有两方面你必须清楚：2 q/ [+ u% K8 x# Z2 ?9 h
7 s" z3 i8 p+ `2 f$ z0 L- E
               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。
' o. r& _* b2 J# U$ T+ @
; u" j9 ]# h9 E8 D: W6 j  L               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。0 b1 o6 m+ g' q& p4 O
: R  ^& O  J' c) |1 P1 [! w
     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

amosummer

回复 深海寂寞鱼 的帖子" t% @! I- q9 H+ p2 C' x
( x  p* I3 v" \# v( n
非常感谢！你的信息对我帮助很大！

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子) d1 D" h/ D$ p. g. [; L
1 h; w4 x" _' |2 m0 H# X
你太客气了。
9 V. f$ T$ M( u/ U' r( }7 d' f6 E- y  t
  U! g9 m, P/ q: L0 h# t: Z能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。
- y- t# g6 c2 ~- q: h
4 v! x' Y: U3 L# W1 E( J: }6 f欢迎继续交流。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子# M* u6 f$ ?  f

3 Q2 C* B. E: ?4 K你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子1 H+ {7 w( X+ u" M( o1 c: J
. ~$ ~# V& f6 B% v
to Rena:: R1 g, M: i& v4 i% [! Y

6 }+ X! n5 T% \& n$ u8 u$ m! U    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
( p# Q6 |' z- X1 K, C
2 Y6 H7 S% n. `- P. q$ H, k3 V0 t    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
7 {* I2 E9 m: h6 o# H. P
; u6 Y. I! t7 D, M; }    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

回复 Rena 的帖子' i6 _5 j! d! ?$ |+ v7 z; P: O5 m4 a
4 p  S$ K5 f( @5 }' e# u' X
to Rena:
+ ~2 F0 i+ {4 M" u6 w' y* b3 J  c5 y- \+ F" U+ Z2 F
    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
+ _" O" W/ T7 ?, R5 E5 u, f0 O1 j+ B; ~1 Y. @
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。9 q, K; {3 N/ e8 ?3 r

5 ]- w/ O+ ?2 J+ z    欢迎继续交流，共同进步。

Rena

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" w3 m5 R3 [! M& @% P
- g; }! g; e. J7 @谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

to Rena：
) V/ Q- _* U) P- q4 K. e
3 U+ M3 i  H- O* Q    个人建议：
) H& N2 j& i% F, L' l4 s+ k7 G+ N/ b1 n$ v
    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。1 v( S' g! A( T8 ^+ R7 z

) N/ m8 D1 d2 a9 k      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）
/ r7 }2 B/ \. j6 w
# K' l' t' {) ]5 t% i       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。2 g2 f& U1 s- a9 Q9 A
- j( d, Z- R8 i# ~9 O9 k' m7 ]
    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。4 ^" y; G' Y. v- H4 i. |( o2 u. E

) n* k' p/ y& [  y         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？
+ U% I) s0 w5 F; q9 }4 b
; Y2 D$ R2 G0 L2 H8 Y4 r         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？
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6 c4 r. G# Y; p6 B1 G* o; {         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？  _% q: [/ A6 c! N& n7 ]) q

( X8 b4 o+ w+ R         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。
; l; e1 s6 ~: P. {# c! G4 v  s$ m. H+ c; J
祝实验顺利。

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回复 深海寂寞鱼 的帖子% o; a& }7 q* ^# W# p- ?# q) S
7 S3 @; s5 e* p! B* c; S' T
我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求