求Hela细胞成球培养条件

amosummer

请问Hela细胞可以进行成球培养？是否需要先在普通DMEM培养基里培养一段时间？如果是的话，在细胞达到多少覆盖率可以更换无血清悬浮培养基？希望各位不吝赐教！

深海寂寞鱼

to amosummer：) [( }7 @$ Y  {) N, |: [  b3 F

- h; k* h+ L3 _    请问你看到过哪篇文献里可以把HeLa细胞养成肿瘤球的吗？
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) V% E! h, o5 n    第一，目前已有的英文文献中似乎还没有提到HeLa细胞可以形成肿瘤球的。只是有文献说HeLa细胞中有侧群细胞，但是没有进行功能验证。3 }1 z" i# e. q6 B% P6 Z
+ W) Q0 Z. \4 q0 o: H
    第二，HeLa在目前常用的（DMEM/F12 + B27 ＋ EGF  +  bFGF）无血清培养条件下，是不形成肿瘤球的。4 ]( n, h. Z& ]" ^4 q

5 Y1 S% A' b; d' ^& e/ ]              当然如果你非要想让它形成肿瘤球的话，你可以尝试其它的培养条件。因为我还无法肯定的说，HeLa就根本不能形成肿瘤球。
2 S6 @7 b/ x/ |( s& Q! D% G0 h  g6 _+ p/ Q" R1 z
     第三，如果你希望研究宫颈癌的话，如果你也希望用细胞系进行研究的话，如果也觉得细胞系研究可以证实你的实验假设的话。
: M. C) L& Q$ d+ ]) `! |           ( X( @$ d9 p0 |- Q* |
               我认为你可以试试看 C-33 A  细胞系，就是通常所说的C33A。它可以很容易的形成非常漂亮的肿瘤球。+ u3 P, n# I* i" [; Q+ V4 C$ N

4 \8 F( a! z& v( ]2 U( e               但有两方面你必须清楚：
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               1. C33A是鳞癌、腺癌、腺鳞癌？这个问题不太清楚。ATCC没有给出明确的答案。  O1 E: m( z: G! o! P; T
2 e) Q: u* w" W3 c
               2. 能形成肿瘤球，未必能实现你的实验假设。风险绝对不小。" g" y8 i' s# R1 q
4 t- l0 _$ s# ?: ?1 @* d# h" Z
     个人观点，仅供参考。欢迎继续交流。

amosummer

回复 深海寂寞鱼 的帖子+ z4 }& a) @" k3 X
: R9 p2 o) J1 u1 a6 T
非常感谢！你的信息对我帮助很大！

深海寂寞鱼

回复 amosummer 的帖子* o4 Z- h+ ^7 v  M7 U0 _

9 {1 {7 e1 }0 q+ A, ]$ z3 y: v7 G3 a你太客气了。) ^3 T+ D' ]: y: E% f: w
4 V( ?2 @. D# o& j
能提供对你有用的信息，让我也很开心呢。
3 E# Y- P( v( [. M8 R, x" b0 r* p) [6 }
欢迎继续交流。

Rena

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" f# k. L, N# o* P6 ~' i: P+ e
. q- _' n3 q: o! T0 K3 q8 ?$ C# r' n你好，请问肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2药物富集后可否无血清悬浮球培养，这方面的文献没有看到，麻烦赐教\(^o^)/~

深海寂寞鱼

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) D$ K2 B( P; u+ r3 h2 k" A9 [% T. o' `( Q& ~
to Rena:
0 w9 M$ Z& j3 A5 j" {
/ j3 U+ m& k1 Z+ E7 R% P* W    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。; U) J: }! E% _& m4 n4 L9 C& J; c) K
- C7 q# s6 M/ W6 L2 j, K1 K
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。
# S9 t7 D. f% B4 B! ~4 d' g
, @. S+ h. O5 Q5 O6 u- y! _8 T" n    欢迎继续交流，共同进步。

深海寂寞鱼

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# Q; J2 K5 }, `* K# V4 W# `& h3 {
to Rena:, v6 L5 K5 K7 q

/ l- C. z9 l: V/ s    肝癌细胞株BEL-7402 、HepG2确实没有直接经验，不敢给你乱说。
+ j% p+ Z9 P: d/ A9 S0 ]/ d3 M: `; X5 ^3 V& K% r- ~
    但是Hep3B是可以在无血清培养基里形成肿瘤球。$ H/ `/ ]' y* ^) Z8 i. h! P/ |
6 V& U( X8 M9 T4 f
    欢迎继续交流，共同进步。

Rena

回复 深海寂寞鱼 的帖子" |& ^+ V2 A" w- m( _: K
+ M& y/ ~1 I5 ?
谢谢，现在实验是采取化疗药物杀伤细胞富集CSC后诱导，结果很不理想，继续探索中。。。再次感谢\(^o^)/~

深海寂寞鱼

to Rena：
: @  k% ^' y! W& [9 w+ P) G; M* {( A) H- H2 A5 T7 j9 R
    个人建议：1 Q. k5 ^; `* t6 Y

; L2 i7 f2 r; S8 p5 [5 o, A    1. 首先搞清楚你所用的细胞系本身是否符合干细胞模型，不然无论你做什么都是浮云。/ u0 k# ?' Q$ N# @" M2 k8 d1 l

3 C5 O9 f5 I  g      （原因是不是每个细胞系就能拿来做肿瘤干细胞相关实验）
$ m* h. V, f8 N
& |0 z$ P3 y* j8 s$ u       尽量多查文献。尽量要有影响因子在5分以上的文献支持。( _: M* D) {1 D4 Z% x! y
" c6 K5 h* x' D( i9 W
    2.  采用化疗药物富集CSC不失为一个方法，但本身有很多不容易实现的问题。" M$ W! d5 g3 _' [1 a
7 q3 E6 e: k* E
         i.  用哪种化疗药物才能杀死非肿瘤干细胞，而尽量让肿瘤干细胞活下来？
' l3 t: P. z+ i* C4 f
- C  j7 u5 q9 S: N3 f' ~; H         ii. 这种药物用多大浓度合适？需要作用多长时间？+ ^9 _1 W5 }, }+ j5 {4 ^& f  C

, i* T2 _% {: V: V$ P5 `% J) w7 U# x1 A         iii. 肿瘤细胞经过化疗药物作用后，是否还能保留其parental细胞的特性？
) F  h0 ?7 F' K  C$ Q. O8 H
6 P0 J1 [) |) Y2 U         这些问题都是需要你探索的。要么就要有现成的参考文献。- B1 j; v5 ]2 f

" X- O: y$ [- o- O祝实验顺利。

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7 t1 A, f2 d/ a5 m5 S  S6 m; k4 Z" Z1 L! _
我现在也要用hela做，很多文献说能做出来了，到底能不能用 hela 跪求