请教如何去除多克隆位点？ - 转基因动物专区干细胞之家

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优秀会员金话筒

楼主

发表于 2011-5-14 13:53 |显示全部帖子

除了你说的用最外侧两个内切酶切割后再用T 4连接酶进行自身连接之外，还可以用同尾酶进行切割后再连接，比如：XhoI+SalI。另外用Klenow补平时要注意，其只能补平5'突出末端。自身连接的效率是很高的。
另外，环化的质粒电泳不好比较大小。还是线性化再比较吧。祝实验顺利！

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