有没有人用密度梯度离心法提取过SD大鼠间充质干细胞啊？

郝晓英

有没有人用密度梯度离心法提取过SD大鼠间充质干细胞啊？
4 R% A  c) M( E/ y' l/ c8 b! [# G1、必须用PBS冲洗吗？
5 B6 I4 R/ p& Z6 t) z- A  z2、离心需要哪几步？温度必须是4度吗
5 |, l/ x, Y$ n0 i( w% D3、Percoll分离液到底该怎么配制啊？0 I/ ~. P  ^; f4 F- z4 G
望解答   谢谢了啊  

金戈

1. PBS 或者生理盐水 或者基础培养基都可以。当然你不能用水来洗 呵呵
1 e6 Z- T9 G- S* \2. 离心洗涤，然后FICOLL，然后吸取淋巴细胞层 然后再洗涤离心
' F6 I. |1 o) e# j% I5 K" {3.你可以直接买大鼠淋巴细胞分离液，percoll如果买进口（我只买过进口的）比较贵，而且配起来很麻烦，很黏，而且还要消毒。是不可能抽滤的哦。

onestar

you can used isolation solution or basic media and centrifuge 1600rpm 6min or 1500rpm, 5min   and using lysing buffer 4-5min and centrifuge again.and so seeding what count you want                       ! x/ f' l- m/ ~$ H

onestar

ficoll method is not fairly good  , percoll as well .

daviehe

用骨髓贴壁法好些

郝晓英

谢谢同志们的热情帮助   现在基本解决  

open1230

密度梯度离心法获得的间充质干细胞增殖能力会受到一些影响，如果楼主对纯度的要求不是特别高的话可以选择全骨髓法。