
- 积分
- 58
- 威望
- 58
- 包包
- 0
|
原理︰利用萤光染剂(bisbenzimide, Hoechst 33258)侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体之DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点,即为支原体之DNA,证明有支原体之污染。 9 Z. a* I! e! G9 W9 l! v6 V9 V+ v2 {
· 测试步骤用间接步骤,将待测细胞悬浮液或细胞培养液接种于指示细胞培养液中(indicator cell,例如Vero cell or 3T6 cell),然后培养指示细胞再作萤光染色。正负反应对照组亦可以接种于indicator cell内作为对照。
4 }5 R: L, g& h; }( j; a, U· 待测细胞亦可作直接测试,但需为吸附型细胞,培养后直接作萤光染色。有些细胞易有萤光背景,而干扰结果判读,则建议使用接种于指示细胞之步骤。
% g" M( y3 t; r2 M# E# C3 M8 i· 特点︰简单、经济与灵敏,广泛使用,可作为例行之侦测步骤。可以侦测不易培养之支原体,例如M. hyorhinis,较直接培养法快,约一星期即可知道结果。 ; s3 Y/ ^$ J/ `# S2 T
· 缺点:有时仍会有萤光背景,影响判读。 2 c" T2 o, E3 g8 W4 W6 z7 L
|
-
总评分: 威望 + 2
包包 + 10
查看全部评分
|