求小鼠骨髓间充质干细胞的培养经验

xiaozhu86

取的三周龄的小鼠四肢骨髓及骨渣，培养条件没有问题，营养充足，没有污染，但是原代细胞始终生长缓慢，贴壁细胞不足，形态伸展不佳，急求各位高手经验~~非常感谢

xiaozhu86

培养三天后第一次换液，之后两天换一次，贴壁细胞数量始终不足，生长缓慢~十分不解

xiaozhu86

回复 文武庙 的帖子
3 T/ @+ T& \) e- b
/ X! s( K: r- D没有加特别的因子促进生长，就是普通的含10%的胎牛血清的a-MEM培养液培养的，感觉用的三周龄的细胞活性应该比较好才对啊，但是长得很不理想~想问下，如果加因子的话，这方面您有什么经验么~望不吝赐教，非常感谢！

xiaozhu86

回复 onestar 的帖子- n5 Q% A% {) C, v! o( {3 v

( N9 v) L# N6 I" ^* r关于骨渣分析有可能骨质中的一些成分或分泌的东西能够促进细胞的生长，特意留的。如果不要的话直接只提取骨髓~~试试看下。谢谢

xiaozhu86

回复 onestar 的帖子5 Y7 A' A# _. n3 |  A8 M( v

& s4 `) c( r/ s2 R嗯嗯，大家互相交流下经验，看哪样生长的最好，O(∩_∩)O~

xiaozhu86

回复 寒小溪 的帖子# ~0 z0 d& k3 u3 _

2 z  h/ `5 u8 v" \我们也是，用注射器先把骨髓冲出了，然后剩的骨就剪的很粉碎一起培养~最近试了下直接不冲骨髓，把骨直接剪碎培养，缩短操作时间，目前观察生长状况还可以，差别不是很大~

xiaozhu86

回复 death0270 的帖子1 d: C3 `3 J- N' ?* y
1 X" H. |. h& n2 R, i3 C) ]8 j
嗯~是，有考虑这个，发现密度太低的时候的确是很难良好的生长，是不是密度依赖性？除外这个在想还有没有别的因素呢