请教一个做siRNA的问题

mckf111

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% P+ ]# ^- u2 [' k* U构建RNAi质粒必须要用pSUPER系列吗 我手头上的pIRES2-EGFP载体能用么0 \' o. T/ i- p/ E
或者说 要表达shRNA的质粒有什么特殊要求吗

mckf111

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谢谢

amigel

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4 F& ^1 ]  K. I( I$ d: w4 H1 E& {现在表达shRNA多用pol III依赖型的启动子如U6/H1驱动载体,常见的有pSUPER和pSilencer系列,国产的也有,它们的优点是1.表达广谱；2.终止位点明确，遇到4个连续的T终止转录.除此之外还有II型启动子启动的shRNA表达载体，如CMV启动的pSilencer4.1.现在的最新的shRNA表达载体考虑了miRNA的结构特点尤其是左右翼序列，因而相对与普通的shRNA载体，更易形成成熟的siRNA.但好象现在用得比较多的还是U6/H1驱动载体,pIRES2-EGFP载体似没看到有人用来表达shRNA,可能是启动子或转录终止信号不适合,你拿它换个最常见的U6/H1载体不就得了.

mckf111

有人知道否？