小鼠骨髓间充质细胞传代消化问题 - 间充质干细胞专区干细胞之家

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楼主

发表于 2011-3-24 21:39 |只看该作者 |正序浏览 |打印

我今天首次传代消化了十几分钟对细胞影响是不是很大啊？很是担心

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麻团

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23楼

发表于 2011-5-12 15:48 |只看该作者

我养的Balb/c 小鼠原代还凑活一传代就完了细胞稀稀拉拉长不起来请问大家有什么好方法

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aibi1983

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22楼

发表于 2011-5-11 15:17 |只看该作者

我养的也C57小鼠，原代长的还好~但传代后细胞状态就不是很好，请问有什么好办法？

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zxdlala

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21楼

发表于 2011-4-21 12:05 |只看该作者

不是吧，完了。我消化了10分钟。

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tigerfish

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20楼

发表于 2011-4-21 10:07 |只看该作者

同意楼上Typsin EDTA毒性相对来说比较大，一般我用3分钟就已经可以全部消化下来了，如果超过5分钟都还没下来的细胞估计就算最后下来也不会好好长了。
建议楼主试试看Invitrogen的TrypLE™ Express，这个贵一点，但是性质比较温和，但是消化效率比较高。建议贵重样本用这个来消化

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李1二

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19楼

发表于 2011-4-20 11:15 |只看该作者

我们做的时候一开始也加了EDTA，后来觉得好像状态不是很好就只用0.25%胰酶，放进37度培养箱内，一般3-5分钟，镜下看细胞变圆未脱落就终止，之后吹打的时候要小心，动作要轻柔，尽量不起泡。

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hfl1123

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18楼

发表于 2011-4-19 10:37 |只看该作者

消化时间过长会带有许多杂细胞

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xiaozhu86

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17楼

发表于 2011-3-30 10:50 |只看该作者

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, N9 z( w( w F {8 U$ ~
呵呵，不客气啦~共同学习~

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寒小溪

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16楼

发表于 2011-3-29 21:54 |只看该作者

回复 xiaozhu86 的帖子- H$ ?) @' r+ p0 [6 I

我又提了一批原代可以试试哈谢谢撒

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xiaozhu86

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15楼

发表于 2011-3-29 16:45 |只看该作者

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你可以试下，先用pbs在孵箱内孵育10到15分钟（完全去除血清的影响），然后再用热的胰酶消化，加入胰酶后用手不断平搓培养瓶底部，迅速就能消化下来~希望你的细胞状态会牛牛~O(∩_∩)O~

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