【求助】请大家帮我看看这是MSC成脂成骨诱导图片吗？

feifei105

分离小鼠骨髓间充质干细胞，P1代诱导成骨和成脂20天，请大家帮我看看这是阳性染色吗？成骨用茜素红S染，成脂用油红O。我有3个问题：1. 成脂溶液好像有问题，加进去第3天就有好多细胞死了，跟以前不一样的。战友们有遇到过这种情况吗？还是死的细胞根本就不是MSC，在成脂溶液中活不了。2. 箭头所指也是成脂肪阳性细胞吗？但这跟旁边的脂肪细胞无论从大小还是染色深浅上都有所不同啊？3. 我这是是预实验，没作对照，感觉成骨染色是假的，跟脂肪的分化能力比，也太玄虚了吧？
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luoziwei

我也遇到过这种情况，脂肪滴太不明显了，加大IBMX的量，加胰岛素吧，之前我没加胰岛素就没做好成脂肪诱导，郁闷

luoziwei

下面两幅图还像茜素红，上面的嘛，不太好说。建议你把背景色降低

luoziwei

感觉你像是通过升高饱和度的吧？

tangyvhuang

对于成脂的诱导就是这样的，我做的几次都是大量的死亡，本身诱导实验用的培养环境就不是间充质的生存环境，我们诱导成脂的时候接种的细胞密度就比正常多一些。; d8 K- a8 E: |, ]' Y; l" \
上面两个图是成骨的诱导？实在是看不清楚啊，成骨诱导细胞死的要少。" L! {* E5 Q1 B3 W- J7 V
感觉下面图的细胞就是脂肪细胞，一个大戒指样子，油滴把细胞核都挤到一边去了。

feifei105

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不好意思才回复，我照照片时，一调白平衡就这样，以前不是这样，感觉不太对，骨结节应该没有这么大吧

feifei105

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( z0 M- G7 j. x, h2 m
4 p- @1 X( Z- f我个人觉得还是细胞不纯造成的，但我看文献他们也不纯，但是就是很多细胞紧密排列在一起中间有几个成脂细胞呀，就觉得是不是什么成分多了，毒性太大？