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呵呵。其实你的细胞不算差,只是培养的不得法。根据我的经验:6 e, X! {# T' s+ d% W
第一张图:细胞分得不均匀,通常是没打成单细胞或者分完没摇均匀,重新分了就好了。有一种特例:如果是刚从SVF长出来的第一代,细胞肯定是不均匀的,就不需要担心。
% l' @: J. M4 J4 n9 C) Z' G5 q/ y6 k) _) a第二张图:细胞状态确实不好,分完再养一下,如果状态还不好就扔了。
+ B: F: r$ m$ y8 @第三张图:细胞状态很好,就是太密,一定要分。
2 x5 |: Y8 j9 D, I6 G7 k, f/ |: E% X% g$ q" w q/ c: r
建议:1. 脂肪干细胞90%满的时候按1/3 到1/2分- a& @. Z+ Q) t4 x/ [
2. 培养基最好0.22 微米滤膜过滤,FBS用最好的,用Glutamax代替Glutamine,培养基配完后2星期用完。
0 u7 ?. G M C% e0 c% S 3. 普通的培养基多养几代确实是越长越慢,如果不缺钱的话,就用专门的间充质干细胞培养基,很多公司都有,我用Invitrogen的
! E1 e; ]1 T& ~( N( d* b! W+ h MesenPRO RS™ Medium ,细胞长得快,状态很好。 |
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