我悬浮培养富集乳腺癌干细胞，可是细胞老贴壁怎么办？

lanxiubala

刚开始使用玻璃瓶来培养，我过一个小时就摇晃一次，老贴壁，于是换成了没有进行贴壁处理的国产板进行悬浮培养，可还是要贴，不过没有玻璃瓶贴的厉害。但是在板里进行培养时，摇晃细胞感觉不太管用，请问怎么办啊？为什么啊？

WAX

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9 g, v; k4 Y5 n- p( X8 V( T1 W6 Q1 K- `9 v! T
你培养基里加什么了吗？EGF,bFGF？B27？
$ f$ n3 l4 }  z* q+ B4 M+ C" {不行的话就在培养皿底部铺1%的琼脂。

jefferson

除了确认培养体系无误外, 建议用专门的低贴附培养板或培养瓶培养

lanxiubala

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( a- N3 g8 J- s' |/ M' _) H) k8 ?" P" k& q& H
我只加了EGF,bFGF。培养皿底部铺1%的琼脂？加琼脂是为了什么啊？

lanxiubala

回复 jefferson 的帖子' S. q) d* \% e- g
" ~$ v1 @+ C0 O6 j; h$ n) w
培养体系无误？是指加的因子浓度对铁壁没影响吗？

WAX

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8 v  |& @/ b/ g2 H" o
  q6 F$ K. o$ B' [5 _% C4 ?我也正在养克隆球，我只加EGF,FGF的时候也贴壁，但不明显。不过细胞根本不分裂，不知你的生长分裂吗？
7 K5 A0 q* L6 X! n  G# n+ u我加了B27后，细胞一点都不贴壁。我也不知为什么，用的也是普通养细胞的培养板。  t3 c" @5 @, J  K  t
铺琼脂当然是为了降低细胞的粘附了，防止贴壁的。

lanxiubala

回复 WAX 的帖子8 q0 c0 I- v1 v  \
2 z+ T: C8 n2 k+ p2 z
哈哈，谢啦，我加B27试试。谢谢你啦

shen_coco

lanxiubala 发表于 2011-3-28 20:33 9 k9 u, E) Y# ]% L1 W/ l
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) E4 v' j6 `" [2 E+ [
) ?- n' C, m+ j: ^我只加了EGF,bFGF。培养皿底部铺1%的琼脂？加琼脂是为了什么啊？

! R6 ]1 B$ b+ c6 L: g& ~! i( S请问一下您的琼脂是哪里买的，一般培养皿铺多少琼脂啊，1%是指体积还是质量？

lanxiubala

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2 b! K2 v: y9 V! Z' h7 A6 J3 p* o! J9 V. w7 I6 v; P- c
我也想知道8楼问的

jiays

用CORNING 的低黏附板饲养，加细胞前，先加培养基，10min后可以加细胞