我悬浮培养富集乳腺癌干细胞，可是细胞老贴壁怎么办？

lanxiubala

刚开始使用玻璃瓶来培养，我过一个小时就摇晃一次，老贴壁，于是换成了没有进行贴壁处理的国产板进行悬浮培养，可还是要贴，不过没有玻璃瓶贴的厉害。但是在板里进行培养时，摇晃细胞感觉不太管用，请问怎么办啊？为什么啊？

WAX

回复 lanxiubala 的帖子/ ]& A* \9 \: j
/ T/ b; O$ E; \3 s# r
你培养基里加什么了吗？EGF,bFGF？B27？4 D7 }% J7 H4 M; F# B; l
不行的话就在培养皿底部铺1%的琼脂。

jefferson

除了确认培养体系无误外, 建议用专门的低贴附培养板或培养瓶培养

lanxiubala

回复 WAX 的帖子  g' H( y/ o" G8 ~$ B& K; t& m) o
" A$ z) k  B% C
我只加了EGF,bFGF。培养皿底部铺1%的琼脂？加琼脂是为了什么啊？

lanxiubala

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, t! ?3 H2 J9 A! L, k( }3 E" G; c+ B+ H: V3 S8 g0 {8 G$ |- H" J) L
培养体系无误？是指加的因子浓度对铁壁没影响吗？

WAX

回复 lanxiubala 的帖子0 N* h* a0 J* N6 x. c' A9 A
1 ?! _  v+ `# o, D- L- @9 O
我也正在养克隆球，我只加EGF,FGF的时候也贴壁，但不明显。不过细胞根本不分裂，不知你的生长分裂吗？
1 G' B3 Q. E/ @2 @我加了B27后，细胞一点都不贴壁。我也不知为什么，用的也是普通养细胞的培养板。
3 r  `: O6 e) z# a  R4 Y8 J铺琼脂当然是为了降低细胞的粘附了，防止贴壁的。

lanxiubala

回复 WAX 的帖子4 O3 B# ?2 B) H$ c! _! c
! C! y: P) ]* P' z8 ]( g8 A* B
哈哈，谢啦，我加B27试试。谢谢你啦

shen_coco

lanxiubala 发表于 2011-3-28 20:33
7 d9 i7 Q2 I# p回复 WAX 的帖子
6 s0 i9 j8 ]" R4 J, l1 \9 Q9 \; `. B2 v
我只加了EGF,bFGF。培养皿底部铺1%的琼脂？加琼脂是为了什么啊？

4 V5 }9 |& B) P$ Z- C
请问一下您的琼脂是哪里买的，一般培养皿铺多少琼脂啊，1%是指体积还是质量？

lanxiubala

回复 WAX 的帖子) u* N( N/ f3 O" k( Q
+ I/ X- I" a% D/ y5 V& v5 k
我也想知道8楼问的

jiays

用CORNING 的低黏附板饲养，加细胞前，先加培养基，10min后可以加细胞