brdu阳性细胞

angelyannan

请大家帮忙鉴定一下我染的brdu出了什么问题？？是神经干细胞。我是想问为什么胞浆也着色了，阳性信号不应该是这样的吧？用的是之前没有出过问题的抗体。请大家帮忙分析一下。谢谢。

angelyannan

回复 shuicaoxi 的帖子) f* |( ~, L2 Y
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是的~

shuicaoxi

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哦，好的。多谢你的经验分享哈！多问下，2N盐酸就是2mol/L盐酸吗？

angelyannan

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我的主要原因就是盐酸处理没有把握好，现在我的是2N盐酸处理25min左右（37min），效果还可以~不过这个处理时间还要根据温度变化有所调整，这个还得你自己摸索自己的条件了~

shuicaoxi

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楼主同志，怎么没有后续解答了呢，要善始善终嘛，你后来是怎么解决的呢。我也要做这个实验了，嘿，请教下经验呀！

angelyannan

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好的想，谢谢提醒~

dyg108

顺便说一下，你要把你图片的放大倍数说清楚，要看核的着色最好用×100或者更大，低倍镜或者更低是难以说明问题的。现在这张图片就看不太清楚着色的究竟是胞核还是胞浆。

dyg108

按照我的理解，胞浆着色是正常的。
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因为，Brdu标记的DNA，而一般大家认为的DNA是在胞核里的，但是，线粒体里也是有DNA的，所以也会着色。在Brdu标记时间不长的情况下，胞浆里的颜色会重些，随着细胞分裂的进行，胞浆和胞核的Brdu含量都会降低，那时候可能只能看到胞核着色，或者都不着色了。
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所以，用Brdu标记应该考虑一个时间的问题。时间过长可能出现假阳性，时间太短就会出现你刚才说的问题。

angelyannan

回复 dxb1985 的帖子/ }+ y! u2 Q9 n: W, _- Q9 a

) W9 o( t& W1 j7 d谢谢啦，我再试试

dxb1985

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2 Z9 D- I7 d0 B( D( ]- T+ z; U. i
总觉得你的背景不对