求助双酶切的问题

hbs08230

EcoRⅠ的酶切效率和能力是很好的，所以应该先切speⅠ，然后做取几个ul跑胶确定彻底切开了以后，做一次抽提回收，再用EcoRⅠ切。抽提很重要。
* W9 W2 Z# x& M, S; F同时要注意整个酶切体系中水一定要占到50%，不能说是质粒的浓度不好就减少水到小于50%总体系。同时20ul的总体系的酶切效率比50ul的更好。
. k; C& G8 ~6 _; `( g+ o8 x$ v" X如果不喜欢反复折腾的话建议换酶切点。。。