蛋白银染的问题

fananran2003

胶变黄应该是正常现象，因为是有银离子的原因，你可以水洗时间长一些，银染的步骤应该没问题，个人感觉你因该从你的蛋白样品、跑PAGE的过程上找原因! f" Y- F' B5 `6 y& E- B# M

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如果你不做质谱分析什么的，水的要求并不高，显影液的甲醛是现用现加，建议你的敏化液，显影液重新配，
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我发个简单的配方，我一直用还挺好用，
% Q7 u" C8 F" `' u0 t: O$ b8 b固定 甲醇 250ml、冰醋酸 25ml、加双蒸水至500ml ,30min,水洗2x2min，后水洗1h。
8 B; S4 U" W, @+ c敏化 硫代硫酸钠0.1g加双蒸水至500ml,冲洗 双蒸水 2x30s
3 I) e6 [  a  S+ Y: x1 y银反应 硝酸银0.5g加双蒸水至500ml，避光孵育30min，冲洗双蒸水 2次x5min 1 d2 g8 m2 z, V0 k
显色 碳酸钠10g加双蒸水至500ml，甲醛500ul，现用现加。9 K9 |8 u  x" r3 e. P
终止 观察至想要效果，1%的冰醋酸终止，

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敏化2-5min就行

fananran2003

敏华长短影响不大，就是缩短银染后显色是的时间，试剂新的没问题，你的溶液也都是新的吗？想硝酸银，显色液都容易失效，最好现配，反正也不麻烦