sd大鼠来源的ADSC图片，大家帮助看看！

winqi

本人刚接触ADSC，前段时间提的sd大鼠的，共提了三批，
$ \" n; U5 I, Q刚开始都是这样，觉得长得还不错，密度可能大了点！
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可是等一传代，细胞就变样子了。几批细胞都是这样，细胞铺的太开了！
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培养液就是10%fbs+L-DMEM加双抗。
" t: A: j* T  z6 g/ _4 ^8 J所以请大家给我看看！

clairezy1983

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可能是消化过度导致的哦，传代的时候密度大一点。3 d% N1 `! b0 f$ B7 m
大鼠的MSC我没有做过，我做过小鼠和人的MSC，我一开始做的时候总是存在消化过度的现象，小鼠骨髓来源的MSC消化时间要长一点，人的脂肪和骨髓来源的MSC消化都很快。慢慢掌握就好了，不要着急，多摸索多总结。
- }. u' r& n- S* p! h你可以少加点胰酶。

luwei8157

传代密度大一点，这样铺开的细胞还算可以，大部分实验可以用的
7 K3 w! N7 g2 w8 w; v, j6 q. X0 D如果做再生，尽量状态好点

winqi

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因为贴的太厉害了，很难消化下来！$ ]" R7 H" _2 i- N# L, n, f, P2 @
我先去培养液，pbs冲洗两次，加1ml胰酶，要消化5分钟才能消化下来！传代的时候就怕密度小，都是一传一的。: H. N% j$ D$ ~( ~$ _
有什么需要注意的地方吗？

winqi

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我现在做的是向成骨方向诱导，细胞能用吗？
- s7 Q- A( c/ l" K+ C: j, vADSC在冻存上有什么特殊的要求吗？

clairezy1983

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- F2 V# a9 A$ K9 `( T6 Y我一开始也总是犯这样的错误呢，越传越不好。消化不下来的都不是干细胞了哦，干细胞是相对容易消化的。消化不下来的就不要了。我们实验室有一个经常做小鼠MSC的牛人这么说的。

luwei8157

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可以用 冻存和其他细胞一样 用血清和DMSO就可以

impingfan

我做小鼠的MSC也是类似情况，原代贴壁细胞状态很好，消化后就铺开很大，并且越往下传代细胞状态越不好！每次传代都会有一部分细胞消化不下来，继续加培养基也能长，不知道是不是MSC