sd大鼠来源的ADSC图片，大家帮助看看！

winqi

本人刚接触ADSC，前段时间提的sd大鼠的，共提了三批，
1 \; o, L/ r1 o* R刚开始都是这样，觉得长得还不错，密度可能大了点！
: {  B) i4 u. E1 Q' H, n1 g1 s7 e. ^. M/ E  B1 k( t9 j4 s
可是等一传代，细胞就变样子了。几批细胞都是这样，细胞铺的太开了！2 |8 @% W; U: A# A2 {

# H. Y+ z1 o& @3 g
6 z) D- s9 e, ^* k3 k* W5 O( M5 r: C/ B+ j5 k
培养液就是10%fbs+L-DMEM加双抗。# a( q8 S4 v* o4 m; ^# }
所以请大家给我看看！

clairezy1983

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0 [% `5 e7 \: k: ]/ `' k: D: J" m9 h% h6 m' Q! c
可能是消化过度导致的哦，传代的时候密度大一点。
9 b' E7 ^/ A" y- R大鼠的MSC我没有做过，我做过小鼠和人的MSC，我一开始做的时候总是存在消化过度的现象，小鼠骨髓来源的MSC消化时间要长一点，人的脂肪和骨髓来源的MSC消化都很快。慢慢掌握就好了，不要着急，多摸索多总结。
8 v! ]  v! e  J) H+ b2 R) i你可以少加点胰酶。

luwei8157

传代密度大一点，这样铺开的细胞还算可以，大部分实验可以用的" k/ C6 J# `, Q
如果做再生，尽量状态好点

winqi

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! g: I" r' A: |7 ]0 ]7 ]7 p) _1 t( ~
因为贴的太厉害了，很难消化下来！; s% Z: U. k! Y# [/ C
我先去培养液，pbs冲洗两次，加1ml胰酶，要消化5分钟才能消化下来！传代的时候就怕密度小，都是一传一的。
7 ?6 E2 S1 e8 m有什么需要注意的地方吗？

winqi

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. z3 z, v" u) S0 J7 t
" p3 O) _; a3 Q% y- P, T/ E1 C我现在做的是向成骨方向诱导，细胞能用吗？% @& K5 S5 D; P3 z& V1 e7 b9 ~
ADSC在冻存上有什么特殊的要求吗？

clairezy1983

回复 winqi 的帖子, J5 P- `# @) O
% C# t" a* Z6 M7 J
我一开始也总是犯这样的错误呢，越传越不好。消化不下来的都不是干细胞了哦，干细胞是相对容易消化的。消化不下来的就不要了。我们实验室有一个经常做小鼠MSC的牛人这么说的。

luwei8157

回复 winqi 的帖子9 h$ J: |0 G6 o+ O, {

% ~" ^' _0 s3 L  N; j可以用 冻存和其他细胞一样 用血清和DMSO就可以

impingfan

我做小鼠的MSC也是类似情况，原代贴壁细胞状态很好，消化后就铺开很大，并且越往下传代细胞状态越不好！每次传代都会有一部分细胞消化不下来，继续加培养基也能长，不知道是不是MSC