关于细胞诱导分化？

cheese

我用肝损害病人的血清诱导的大鼠的骨髓间充质干细胞，血清浓度分别为5%、10%、15%，在诱导第一天的时候，细胞出现了脂肪样变似得空泡，在第六天七天的时候，5%、10%组细胞出现了增殖，长得很快，12天的时候，15%的细胞也出现细胞增殖现象，并且，在诱导过程中，始终有细胞在不断的死亡。我想问问大家有没有这方面的经验。在细胞诱导分化的过程中，如果细胞会增殖，为什么增殖的细胞不会被诱导分化？如果不分化，细胞增殖了要不要传代，如果传代了，又怎么控制条件？关于我的细胞，因为是异种血清，而且有很多毒性物质，细胞经过一段时间适应了这种环境而出现增殖，而没有出现细胞分化，有没有可能？

cheese

7 M( r0 I  r5 y( U细胞在诱导第一天的时候就是这个形态了
" q$ ?7 I. S4 |6 o$ g; F
' l/ u! B2 V9 v7 H6 ?这是第6天5%血清组的5 W/ H  x. k7 a1 O0 E

5 ^/ \; a+ m3 q! B! Y这是10%组的，第7天的/ f4 X& w; s8 U% M$ i8 T* q& {0 N
0 x& Z  E! Z! x
这是15%组的，第12天出现的6 a6 v/ s3 \- c6 g5 m& Q" l5 {' h

/ U2 x4 R0 [& w7 k' i# W* @这也是15%组的，第11天发现，12天就这样了，细胞长的很快

开心果王

我在做胚胎干细胞肝向分化的时候，也出现了类似于楼主的脂肪滴样空泡现象。是在分化前几天出现的，随后第四天就开始消失了。想了很久，不知什么引起的。今天诱导到10天后，发现细胞也在增殖，于是消化下来小比例（约1：2）的传代，不知道会不会在增殖。相关的文献一般没有在诱导后期进行传代（可能这时的细胞状态已不是很好），如果能在诱导后期还能保持旺盛的分裂能力，也是令人兴奋的，这样就可以收集更多的hepatocyte-like cells，为细胞替代治疗提供种子细胞！

光风霁月

     我诱导时，未出现空泡现象，具体这种可能与你细胞当时状态，诱导液浓度及毒性可能有一定关系。
6 \  d" d9 O9 ?   从你的图片中可以看出随你血清浓度升高，细胞在诱导前几天死亡率比较高。但最后两幅图什么意思不明白？倒数第二幅细胞死亡了，但最后一幅细胞却呈现增殖现象。0 U8 Q4 d7 R  K8 H9 M
    至于诱导中细胞是否增殖，的确文献中报道诱导中行传代的我没看到，可能细胞密度低，或血清浓度低，抑或细胞诱导液毒性或浓度较大。6 M+ |+ r' t, z7 Q9 z# i# L

7 o" V1 }8 l+ F8 h    但我在诱导中也传代，当然要根据自己的细胞密度而定。

cheese

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) i+ M5 n: s5 n3 K/ w2 k2 V% _8 \5 E2 y6 {" q; D
所有的增殖细胞中均是出现细胞死亡现象之后才出现的增殖，所以我在想，是不是细胞耐受了血清的毒性之后，出现了适应现象，然后开始增殖？！

cheese

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, a  C9 Q7 v( d
  U) k. ^" M% A6 |0 Z7 j" ^' T分化后的细胞还有增殖能力吗？

shixinyi

请问，你这是要往哪个方向诱导骨髓干呢？

光风霁月

回复 cheese 的帖子. ^# p; w" y" @* Z

" s. O' o, [* E1 J/ s+ z7 F   对，我也是这样认为的。9 f, H( C" y$ F1 X) |( i
  就如细菌对抗生素的耐药现象。
* A. I# m9 W$ [  干细胞可能在适应毒性后出现增殖现象，不过我的诱导细胞可未出现死后复生啊！
7 b6 A& x6 z# v7 e9 x1 E& y   你可以重复

taoqilh

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( B8 {1 i# A7 F3 u0 d
- w+ Y$ @0 Z6 v  e/ S: w3 }在细胞转染的时候有看到过你这样的现象，应该是培养液的环境不适合细胞生长导致，但后期生长，没遇到过

cheese

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肝细胞