关于细胞诱导分化？

cheese

我用肝损害病人的血清诱导的大鼠的骨髓间充质干细胞，血清浓度分别为5%、10%、15%，在诱导第一天的时候，细胞出现了脂肪样变似得空泡，在第六天七天的时候，5%、10%组细胞出现了增殖，长得很快，12天的时候，15%的细胞也出现细胞增殖现象，并且，在诱导过程中，始终有细胞在不断的死亡。我想问问大家有没有这方面的经验。在细胞诱导分化的过程中，如果细胞会增殖，为什么增殖的细胞不会被诱导分化？如果不分化，细胞增殖了要不要传代，如果传代了，又怎么控制条件？关于我的细胞，因为是异种血清，而且有很多毒性物质，细胞经过一段时间适应了这种环境而出现增殖，而没有出现细胞分化，有没有可能？

cheese

% U5 t. t: B) A3 t( |% y4 f% {- g, L细胞在诱导第一天的时候就是这个形态了
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  U+ U' }1 a' |0 C# M' i这是第6天5%血清组的% l0 W# [3 U* Y6 k5 V' G  m) C

1 {9 D& h2 V2 c+ {" v这是10%组的，第7天的
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& v; z. L( o8 \+ s- J  x; [这是15%组的，第12天出现的
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% j/ x9 _5 w. F这也是15%组的，第11天发现，12天就这样了，细胞长的很快

开心果王

我在做胚胎干细胞肝向分化的时候，也出现了类似于楼主的脂肪滴样空泡现象。是在分化前几天出现的，随后第四天就开始消失了。想了很久，不知什么引起的。今天诱导到10天后，发现细胞也在增殖，于是消化下来小比例（约1：2）的传代，不知道会不会在增殖。相关的文献一般没有在诱导后期进行传代（可能这时的细胞状态已不是很好），如果能在诱导后期还能保持旺盛的分裂能力，也是令人兴奋的，这样就可以收集更多的hepatocyte-like cells，为细胞替代治疗提供种子细胞！

光风霁月

     我诱导时，未出现空泡现象，具体这种可能与你细胞当时状态，诱导液浓度及毒性可能有一定关系。' V+ w- Q/ F9 [, b2 g8 J0 N
   从你的图片中可以看出随你血清浓度升高，细胞在诱导前几天死亡率比较高。但最后两幅图什么意思不明白？倒数第二幅细胞死亡了，但最后一幅细胞却呈现增殖现象。
) a' a9 A4 [( L  f) k' u$ D    至于诱导中细胞是否增殖，的确文献中报道诱导中行传代的我没看到，可能细胞密度低，或血清浓度低，抑或细胞诱导液毒性或浓度较大。
6 v( s6 Q( w, J2 h( S$ d
$ r8 ?/ {9 `/ l2 @; N3 ~0 W    但我在诱导中也传代，当然要根据自己的细胞密度而定。

cheese

回复 光风霁月 的帖子: a% L7 g7 \$ V. Z) A. |
) N6 }) |& }: t2 j4 B
所有的增殖细胞中均是出现细胞死亡现象之后才出现的增殖，所以我在想，是不是细胞耐受了血清的毒性之后，出现了适应现象，然后开始增殖？！

cheese

回复 开心果王 的帖子
& \. ]& u5 c" c% S8 g! `8 R
3 F# f% S4 a6 z! h分化后的细胞还有增殖能力吗？

shixinyi

请问，你这是要往哪个方向诱导骨髓干呢？

光风霁月

回复 cheese 的帖子
  D" p& S  ^$ `4 f% C' V; p! n9 }( I3 ]! ^& [7 U3 T4 N) Q: C
   对，我也是这样认为的。
7 N, H3 z7 F6 @( p" b  就如细菌对抗生素的耐药现象。! e- x% N: W$ @% I
  干细胞可能在适应毒性后出现增殖现象，不过我的诱导细胞可未出现死后复生啊！
  O6 |( T' V) c2 w9 Y   你可以重复

taoqilh

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( N7 Y, c5 w1 l. I7 W* [/ U3 N  ~7 R1 y; ]! Q8 X2 x
在细胞转染的时候有看到过你这样的现象，应该是培养液的环境不适合细胞生长导致，但后期生长，没遇到过

cheese

回复 shixinyi 的帖子
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8 }3 }4 V1 {* a肝细胞