组织消化后细胞太少怎么回事？

amosummer

今天消化了几个肿瘤组织，每个越1cmX1cm 大小，用剪子剪碎后，加培养液4度过夜。次日，再剪成很碎，用透明质酸酶和胶原酶消化2小时，37度。然后过100目和40目的细胞筛，其中用胰酶消化5分钟。结果发现细胞量很少，只有100000个左右。本来打算分选的，这么少都没法做。我之间是否有什么步骤不对才导致细胞量如此少。请各位大侠指导啊！

amosummer

怎么没人回答我的问题呢？

hndxws

原代培养的细胞需要驯化一段时间吧，因为大部分细胞会不适应培养环境死掉的。我们实验室的工作人员养这个都要养两三个星期才会有点细胞贴壁的样子。还有他做的时候没把细胞消化的很碎，他说细胞消化太多会死的，他的经验是，不消化的那么彻底，然后细胞会从这些消化块里爬出来的，就是时间长点。

amosummer

回复 hndxws 的帖子, C* ~0 K5 W4 u5 D1 U8 T( c

4 D' r0 J2 r6 W0 L: e9 u5 L; O! z4 s他不需要过细胞筛吗？有用干细胞培养基养过吗？

hndxws

没有。他是养肿瘤组织的细胞的，没有过筛，他说细胞太散的话长不好。

shy1223

回复 hndxws 的帖子) N8 E5 e. _$ A" \4 w, I

2 s- r# P1 T- u9 \& G您好！想请问一下你知道你们实验室的人是怎么消化原代肿瘤组织的吗？我消化了几次，力度掌握不好，基本上没有什么细胞，组织块培养的时候也没有看到细胞，老板说理论上细胞很容易爬出来呀，可是我做的没有细胞爬出来，郁闷ing，您和你们实验室的专家有何高见？请您告诉我一下你们那的具体消化步骤，谢谢

shy1223

您好！想请问一下你知道你们实验室的人是怎么消化原代肿瘤组织的吗？我消化了几次，力度掌握不好，基本上没有什么细胞，组织块培养的时候也没有看到细胞，老板说理论上细胞很容易爬出来呀，可是我做的没有细胞爬出来，郁闷ing，您和你们实验室的专家有何高见？请您告诉我一下你们那的具体消化步骤，谢谢

细胞海洋

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