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[请教] ficoll和percoll   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-20 11:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请问ficoll和percoll两种方法分离细胞各有什么优缺点?
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沙发
发表于 2011-4-20 15:26 |只看该作者
我也想知道耶·~~

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藤椅
发表于 2011-4-21 08:47 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑
" E( }# a8 F* [# u6 O5 Y! v! e) o! z- @7 s" N
1. 价格:GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。3 o: t& F6 q3 ~5 n( h, K

+ h% {2 l- s& v/ q! V2 q- ^# A2. 原理:isopycnical centrifugation. 即根据密度离心,将不同密度的物质分离开来。(而非根据大小的rate zonal centrifugation)
# C4 s' h" t% q* \, Q6 A3 V4 m! g  f
3. 性质:* H1 i! g. F% }7 P4 T0 Z. g
-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.2 T$ ], y- V& S% T

( v. ]# M0 S+ S2 r, u3 D, \1 i-Percoll: 有PVP-coated,而且性质特殊:在10000g以下,可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml);
; {- t6 A' i0 m2 ^) N6 B9 `8 }在10000g以上,能够沉降形成continue gradient. 范围如下:( ^& J0 w" o, E* }7 N' ?
1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl
+ N4 s9 t  |! F, F1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose
+ {2 W+ t# \/ T# {percoll还有一个优点,它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS),所以做细胞分选很方便。) \+ g/ m# m2 ~, x: E

6 g: k# m8 t2 U9 @4. 用途:) [; _3 M" s# L1 X/ o
- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过,同时也适用于脊髓干细胞的分离,骨髓干细胞的分离,也能用于颗粒细胞的分离。当然, 还有一些衍生用途,详见参考文献。
- w# _8 f# W" u/ D/ y
7 I3 ^3 p1 V2 i9 ^- Percoll: 用途广泛得多,可以自制特定密度的continuous gradient,特别为自己优化分离细胞的实验条件,而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广,更多的应用在亚细胞结构的分离,病毒分离等。/ C0 T7 b& T% K( O5 \

* f+ S( ~% C# L; O" i& k参考: Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf (874.22 KB) Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf (1.07 MB)
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板凳
发表于 2011-4-21 08:50 |只看该作者
本帖最后由 dqm185 于 2011-4-21 08:54 编辑
7 b" n! ~+ o* N+ a% D8 v! w5 w; e2 z0 s* z5 F0 _& Z0 b
由于附件的版权原因,请版主设置附件回复可见,谢谢

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发表于 2011-4-21 09:18 |只看该作者
很有用,谢谢

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发表于 2011-4-28 16:16 |只看该作者
很有用,谢谢

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7楼
发表于 2011-5-8 13:52 |只看该作者
很有用的知识,谢谢了

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发表于 2011-6-7 19:44 |只看该作者
很有用,谢谢

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9楼
发表于 2011-6-8 16:14 |只看该作者
看看看看

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10楼
发表于 2011-6-9 10:44 |只看该作者
步骤很详细
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