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[请教] ficoll和percoll   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-20 11:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问ficoll和percoll两种方法分离细胞各有什么优缺点?
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沙发
发表于 2011-4-20 15:26 |只看该作者
我也想知道耶·~~

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藤椅
发表于 2011-4-21 08:47 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑 % e3 o: o3 ^# M' l" H) A0 |) P
0 y6 W; h; ~: s+ Z
1. 价格:GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。
/ w8 T# ]& p1 V& H7 f, z
6 N' n2 v7 L( M2 U$ M% Q8 g- z. v. i  J2. 原理:isopycnical centrifugation. 即根据密度离心,将不同密度的物质分离开来。(而非根据大小的rate zonal centrifugation)( e6 p  ~& D# A" X. f
( E7 u2 E, Q( G4 k8 C
3. 性质:
: r3 b# @$ Z4 a-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.# @/ g/ z7 j5 M1 \2 r* y: }4 q# F
3 g3 j5 P9 U2 w' x% W0 y- p
-Percoll: 有PVP-coated,而且性质特殊:在10000g以下,可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml);
9 t$ P7 U# U$ p7 E' d在10000g以上,能够沉降形成continue gradient. 范围如下:
( h' P: G) ~2 N% b; ?1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl
# G) l( _6 x: n1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose
/ w! N3 d  J0 h: |percoll还有一个优点,它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS),所以做细胞分选很方便。
/ Y, d/ ]( S* V
/ G8 U% J/ u. E8 j( [4. 用途:: e3 H; J+ L0 g) S
- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过,同时也适用于脊髓干细胞的分离,骨髓干细胞的分离,也能用于颗粒细胞的分离。当然, 还有一些衍生用途,详见参考文献。2 O9 h$ q& l; h$ i8 k' D1 s5 O
# x4 ~! r& O; s, n( B1 f$ U  ~
- Percoll: 用途广泛得多,可以自制特定密度的continuous gradient,特别为自己优化分离细胞的实验条件,而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广,更多的应用在亚细胞结构的分离,病毒分离等。
9 H8 Z; P: ]5 ^8 _* N5 _, C# o6 ~2 A: O/ v+ c' D
参考: Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf (874.22 KB) Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf (1.07 MB)
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板凳
发表于 2011-4-21 08:50 |只看该作者
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本帖最后由 dqm185 于 2011-4-21 08:54 编辑
0 E: s+ c. ?/ I+ D: I+ Z* {
0 }  C+ {$ D, L  z" L0 k由于附件的版权原因,请版主设置附件回复可见,谢谢

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报纸
发表于 2011-4-21 09:18 |只看该作者
很有用,谢谢

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发表于 2011-4-28 16:16 |只看该作者
很有用,谢谢

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发表于 2011-5-8 13:52 |只看该作者
很有用的知识,谢谢了

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发表于 2011-6-7 19:44 |只看该作者
很有用,谢谢

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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-6-8 16:14 |只看该作者
看看看看

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发表于 2011-6-9 10:44 |只看该作者
步骤很详细
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