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[请教] ficoll和percoll   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-20 11:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请问ficoll和percoll两种方法分离细胞各有什么优缺点?
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沙发
发表于 2011-4-20 15:26 |只看该作者
我也想知道耶·~~

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优秀会员 金话筒

藤椅
发表于 2011-4-21 08:47 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑
! h( o' a3 M; Z3 R2 D; d/ o. u, o' D, O* O, q/ Y; l5 I& E
1. 价格:GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。
- W- N. c* M9 x# J1 @0 M. B! t4 c; L0 v
2. 原理:isopycnical centrifugation. 即根据密度离心,将不同密度的物质分离开来。(而非根据大小的rate zonal centrifugation)' b3 s9 z% F' c2 r

. i; K: o* C8 k/ C. ?9 }3. 性质:
& g$ G. G, ~0 m  ]1 ~-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.- C7 a- I/ a: O7 w
% T8 x1 C3 V+ `9 I$ m
-Percoll: 有PVP-coated,而且性质特殊:在10000g以下,可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml);
9 \3 H1 e+ e3 }" g在10000g以上,能够沉降形成continue gradient. 范围如下:3 M: W/ q6 C. ~' E$ }, w
1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl. ]3 K" U+ ?* Y  C9 s
1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose' t* g- Y; K& G9 W; {! X" F% P
percoll还有一个优点,它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS),所以做细胞分选很方便。
; ?. f0 l# V* Z5 u5 f
# p* D2 k! }1 F' P4 x, H4. 用途:
3 x" @! U! }" V; I/ @* h- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过,同时也适用于脊髓干细胞的分离,骨髓干细胞的分离,也能用于颗粒细胞的分离。当然, 还有一些衍生用途,详见参考文献。
! l; }3 w1 |+ V. Q* t: |' G7 W& }/ F% D& @$ V7 z5 k# b* E
- Percoll: 用途广泛得多,可以自制特定密度的continuous gradient,特别为自己优化分离细胞的实验条件,而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广,更多的应用在亚细胞结构的分离,病毒分离等。5 a2 Q* [" y! [1 o6 `* r: y
/ W! c5 ^. S1 _% x# Z- C
参考: Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf (874.22 KB) Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf (1.07 MB)
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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2011-4-21 08:50 |只看该作者
本帖最后由 dqm185 于 2011-4-21 08:54 编辑
- W9 h& C% j9 O' X4 Y6 q5 x  V* A" i! P" i4 s
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报纸
发表于 2011-4-21 09:18 |只看该作者
很有用,谢谢

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地板
发表于 2011-4-28 16:16 |只看该作者
很有用,谢谢

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7楼
发表于 2011-5-8 13:52 |只看该作者
很有用的知识,谢谢了

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8楼
发表于 2011-6-7 19:44 |只看该作者
很有用,谢谢

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金话筒 优秀会员

9楼
发表于 2011-6-8 16:14 |只看该作者
看看看看

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10楼
发表于 2011-6-9 10:44 |只看该作者
步骤很详细
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