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[请教] ficoll和percoll   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-4-20 11:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请问ficoll和percoll两种方法分离细胞各有什么优缺点?
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沙发
发表于 2011-4-20 15:26 |只看该作者
我也想知道耶·~~

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优秀会员 金话筒

藤椅
发表于 2011-4-21 08:47 |只看该作者
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑 0 g( N- ?9 o" [4 M
6 X0 _  f, `4 O7 z4 T. u( h2 j
1. 价格:GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。
* \9 Y5 y( _+ a+ @& [) C- R9 W3 q+ S4 X; N
2. 原理:isopycnical centrifugation. 即根据密度离心,将不同密度的物质分离开来。(而非根据大小的rate zonal centrifugation)
, Z! Q4 s% R0 g$ M/ i7 z  ]; |' ]
; X/ C9 j( Z7 M3. 性质:
4 H0 t+ u0 o# a2 W1 o" |-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.8 R( `: S4 f; c

5 M# n% P) H+ K: M% E+ X-Percoll: 有PVP-coated,而且性质特殊:在10000g以下,可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml);
: a( K- {( w8 ]6 T( C在10000g以上,能够沉降形成continue gradient. 范围如下:
; K2 E$ l2 D7 S7 J& G5 l2 ^1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl
1 a8 Q  N! _6 h4 t! w1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose
$ Z2 j5 c) @' k$ Upercoll还有一个优点,它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS),所以做细胞分选很方便。' _+ X& z7 y+ Q1 Y+ n

" ^4 l3 g0 ?8 M& H- e+ t+ Y4. 用途:
. ~: n" D8 u# B5 T# H* v9 j- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过,同时也适用于脊髓干细胞的分离,骨髓干细胞的分离,也能用于颗粒细胞的分离。当然, 还有一些衍生用途,详见参考文献。
1 D& c1 g, G1 F4 V3 M  `7 O8 r- N3 I' M8 f# f$ o, l
- Percoll: 用途广泛得多,可以自制特定密度的continuous gradient,特别为自己优化分离细胞的实验条件,而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广,更多的应用在亚细胞结构的分离,病毒分离等。
. `/ q2 D; O# d, }0 y; A& s$ r" E9 Y- [4 f
参考: Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf (874.22 KB) Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf (1.07 MB)
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优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2011-4-21 08:50 |只看该作者
本帖最后由 dqm185 于 2011-4-21 08:54 编辑 2 [0 D9 G! {0 S" U( U

# Q) U! N& M( p) s- H* T由于附件的版权原因,请版主设置附件回复可见,谢谢

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发表于 2011-4-21 09:18 |只看该作者
很有用,谢谢

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发表于 2011-4-28 16:16 |只看该作者
很有用,谢谢

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发表于 2011-5-8 13:52 |只看该作者
很有用的知识,谢谢了

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发表于 2011-6-7 19:44 |只看该作者
很有用,谢谢

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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-6-8 16:14 |只看该作者
看看看看

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发表于 2011-6-9 10:44 |只看该作者
步骤很详细
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