|
- 积分
- 233
- 威望
- 233
- 包包
- 636
|
本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑 / O }5 j& h8 L# V% q
, }6 b i8 d7 P% {7 W1. 价格：GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。
7 [# E4 c0 P( m$ B* f* K" R4 |- J2 y5 A/ V0 e. a I
2. 原理：isopycnical centrifugation. 即根据密度离心，将不同密度的物质分离开来。（而非根据大小的rate zonal centrifugation）
7 F5 _7 |& {9 o
6 f: H- ?8 g( [3. 性质：
! d+ ?- ]# Z5 _ V& ]/ ~# u4 N$ g-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.
! G/ ^. F8 j! {, B' y6 P# l
% u7 f% w+ Q0 L% A& J6 k-Percoll: 有PVP-coated，而且性质特殊：在10000g以下，可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml)；
" U( w# t* _5 I" K在10000g以上，能够沉降形成continue gradient. 范围如下：! B% a0 A$ K9 K& K1 ~- w% o
1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl
4 L7 N$ U/ F( l+ _8 l7 b1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose: M1 L0 P& f/ k6 p; D
percoll还有一个优点，它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS)，所以做细胞分选很方便。
4 K7 x3 V0 w; m4 }" q* O* R5 E ]8 t
9 p- U! j- I9 H7 k* `/ z$ f4. 用途：
" y2 F( f( t) c0 D" d7 T' s+ |- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过，同时也适用于脊髓干细胞的分离，骨髓干细胞的分离，也能用于颗粒细胞的分离。当然， 还有一些衍生用途，详见参考文献。
5 y0 @9 `6 Q5 k3 M/ |
z+ [1 ], S5 r) ]. z f- Percoll: 用途广泛得多，可以自制特定密度的continuous gradient，特别为自己优化分离细胞的实验条件，而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广，更多的应用在亚细胞结构的分离，病毒分离等。5 C' e; U5 c7 A2 K
E; G+ v3 J! G x1 G
参考:
Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf
(874.22 KB)
Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf
(1.07 MB)
|
-
总评分: 威望 + 30
包包 + 50
查看全部评分
|
发表于 2011-4-20 11:14
很有用，谢谢
