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本帖最后由 细胞海洋 于 2012-2-13 02:39 编辑 ; D. _ ]) e' N2 S3 w
. C7 [ |2 f: p6 @: M1. 价格：GE的percoll的价格比ficoll贵两到三倍。
3 y4 X8 J# }& e% l+ }6 `5 i+ k0 M$ u: {7 L' ^3 ^
2. 原理：isopycnical centrifugation. 即根据密度离心，将不同密度的物质分离开来。（而非根据大小的rate zonal centrifugation）
! ?! I2 E2 u/ V3 V- G! l# ?
% L' `% P: E, h# W% F) e3. 性质：- ~9 q3 s. b% o
-ficoll: 所有的性质都是特别为外周血的单核细胞分离而优化过的。有1.084 ± 0.001 g/ml and 1.073 ± 0.001 g/ml, 1.077 g/ml三种.9 y2 W N% L/ ~5 i
& D0 Y) L0 e g" Y' V7 \ {-Percoll: 有PVP-coated，而且性质特殊：在10000g以下，可以形成很广范围的discontinue gradient (from 1.004 to 1.080 g/ml)；
( z8 t7 ]0 u, |" @! x( p; v: ~5 N在10000g以上，能够沉降形成continue gradient. 范围如下：- Q# c) [8 i9 r) J; N
1.017 - 1.142 g/ml for Percoll in 0.15 M NaCl
, Q0 |3 p; d) i# B( z l1.037 - 1.136 g/ml for Percoll in 0.25 M sucrose
6 p( Z2 K7 n2 `+ d2 W2 t4 C7 Dpercoll还有一个优点，它不影响fluorescent activated cell sorting (FACS)，所以做细胞分选很方便。* s6 Z' a! W1 A, {2 T
5 F% C# E' i. b: F* Z' \4. 用途：
) H. G1 m; n1 f9 ?6 O Y- ficoll: 首先当然是从外周血中分离单核细胞。不过，同时也适用于脊髓干细胞的分离，骨髓干细胞的分离，也能用于颗粒细胞的分离。当然， 还有一些衍生用途，详见参考文献。
/ @6 }* u6 ^$ k( x
+ p8 J# k3 Q# o! [9 ?5 g% b/ X- Percoll: 用途广泛得多，可以自制特定密度的continuous gradient，特别为自己优化分离细胞的实验条件，而且直接可以上FACS分选细胞。由于其密度涵盖范围广，更多的应用在亚细胞结构的分离，病毒分离等。
6 W. Z6 n1 @' Y- @9 a C0 i
+ ` Q( s6 a5 A$ h4 {1 d参考:
Ficoll - Isolation of mononuclear cells- Methodology and applications.pdf
(874.22 KB)
Percoll - Cell Separation Media- Methodology and Applications.pdf
(1.07 MB)
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发表于 2011-4-20 11:14
很有用，谢谢
