猪成纤维细胞如何原代培养 - 实验室综合讨论区干细胞之家



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查看: 13338\|回复: 7	go [请教] 猪成纤维细胞如何原代培养 [复制链接]

HMC

新手上路

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楼主

发表于 2011-4-24 08:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

各位研究员，请教猪成纤维细胞如何原代培养？那种方法比较好？具体操作如何进行，谢谢

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沙发

发表于 2011-4-24 10:13 |只看该作者

跟普通的成纤维培养方法一样

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牙牙丫丫123

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藤椅

发表于 2011-4-24 20:16 |只看该作者

你的是成体的还是胎儿的？

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牙牙丫丫123

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板凳

发表于 2011-4-24 20:19 |只看该作者

胎儿的直接剪碎后用胰酶消化，终止消化后离心接种就好，要是成体的，我用过贴壁培养法和消化两种方法，本人感觉贴壁的方法还不错，这样可以多次收获细胞，而且没有胰酶的消化，对细胞的损伤小，细胞整体形态好，不易老化

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HMC

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报纸

发表于 2011-4-24 20:35 |只看该作者

胰酶浓度呢，还有消化时间可否告知啊

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461650833

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地板

发表于 2011-4-24 21:46 |只看该作者

回复 HMC 的帖子
7 j; ^. C8 F3 r9 d- x, Y
0.25%胰酶 37°消化30秒到1分钟应该就可以了

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HMC

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7楼

发表于 2011-4-25 08:35 |只看该作者

这个清楚，是原代培养消化时候的胰酶消化

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牙牙丫丫123

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8楼

发表于 2011-4-25 19:51 |只看该作者

回复 HMC 的帖子2 c0 _# a& B1 J$ r" c/ m/ U

一般胰酶的浓度是0.25%，消化时间要具体依据你的实验待定，一般是根据你将组织块剪碎的程度决定消化时间的长短，如果剪的很碎，一般10分钟，拿出来看看是否单个细胞很多，要是不多就再消化5分钟……一般就差不多。要是剪的不是很碎，那就消化20分钟左右

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